Anticorpo policlonale anti-HDAC4 per WB, IHC-P, ELISA - P56524

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di HDAC4

• HDAC4 è una deacetilasi istonica di classe IIa che reprime la trascrizione rimuovendo i gruppi acetile dalle lisine N-terminali degli istoni core (H2A, H2B, H3, H4), promuovendo la condensazione della cromatina.
• Attraverso la sua estensione N-terminale, HDAC4 interagisce con i fattori di trascrizione MEF2 (MEF2A, MEF2C, MEF2D), regolando la differenziazione e l'ipertrofia muscolare.
• Nel cancro al seno, HDAC4 partecipa al silenziamento epigenetico di ESR1 mediato da MTA1, contribuendo alla resistenza alla terapia ormonale.
• HDAC4 deacetila HSPA1A e HSPA1B sulla lisina 77, potenziando la loro interazione con il co-chaperone STUB1 e influenzando il controllo della qualità proteica. Riferimenti correlati: PMID:27708256
• HDAC4 si sposta tra il nucleo e il citoplasma; la fosforilazione da parte di chinasi come CaMK promuove il legame con 14-3-3 e la ritenzione citoplasmatica, mentre sumoilazione e ubiquitinazione ne regolano la stabilità e la localizzazione.
• L'enzima dipende dallo zinco, con un dominio catalitico conservato che coordina Zn²⁺; le mutazioni che compromettono il legame del metallo ne riducono l'attività.
• Lo splicing alternativo di HDAC4 genera isoforme con espressione tessuto-specifica e funzioni regolatorie distinte.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende i residui 451–650, situati all'interno del dominio deacetilasico conservato; questa regione è identica per oltre il 95% tra uomo, topo e ratto, spiegando l'ampia reattività crociata.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda a circa 119 kDa; utilizzare lisati arricchiti in frazione nucleare (ad es. HeLa, C2C12) e validare con controlli positivi e negativi appropriati.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), è necessario ottimizzare le condizioni di recupero antigenico (ad es. tampone citrato pH 6,0) e la diluizione dell'anticorpo primario; sono possibili pattern di colorazione sia nucleari sia citoplasmatici, a seconda del tessuto e dello stato patologico.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; per i saggi sandwich si raccomanda l'abbinamento con un anticorpo di rilevazione anti-HDAC4 validato.
• La natura policlonale offre una robusta amplificazione del segnale, ma la coerenza tra lotti deve essere verificata per le applicazioni quantitative.

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