Anticorpo monoclonale anti-HDAC6 per WB, ELISA - Q9UBN7

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'HDAC6

• L'HDAC6 (istone deacetilasi 6) è una deacetilasi di classe II citoplasmatica, codificata dal gene HDAC6 (Gene ID: 10013), e funge anche da ligasi E3 ubiquitina-proteica. È nota con gli alias HD6, JM21, CPBHM e PPP1R90, e presenta due domini catalitici e un dominio C-terminale di legame all'ubiquitina con dito di zinco.
• L'HDAC6 deacetila principalmente un'ampia gamma di substrati non istonici, tra cui α-tubulina, cortactina (CTTN), perossiredossine (PRDX1/2), SQSTM1 e fattori di trascrizione, regolando così la dinamica dei microtubuli, l'autofagia, la risposta allo stress ossidativo e l'espressione genica. Riferimenti correlati: PMID:12024216 PMID:18606987 PMID:20308065 PMID:30538141 PMID:31857589 PMID:38534334
• Gioca un ruolo critico nella motilità cellulare dipendente dai microtubuli deacetilando la α-tubulina alla lisina 40, che destabilizza i microtubuli dinamici e promuove il disassemblaggio delle ciglia. Riferimenti correlati: PMID:17604723 PMID:26246421
• Nella via aggresoma-autofagia, l'HDAC6 riconosce le proteine mal ripiegate poliubiquitinate e le trasporta all'aggresoma, facilitando la loro clearance tramite autofagia e contribuendo all'omeostasi proteica. Riferimenti correlati: PMID:17846173
• L'HDAC6 modula la tolleranza al danno al DNA deacetilando e ubiquitinando le proteine di riparazione del mismatch del DNA MSH2 e MLH1, portando alla loro degradazione e a una ridotta attività di riparazione, con implicazioni per la chemioresistenza. Riferimenti correlati: PMID:24882211 PMID:30770470
• Come sensore di valina, l'HDAC6 lega la valina tramite le sue ripetizioni SE14 specifiche dei primati; in condizioni di privazione di valina, si transloca nel nucleo per deacetilare TET2, inducendo la demetilazione del DNA e il danno. Riferimenti correlati: PMID:39567688
• L'HDAC6 si localizza nel citoplasma, nel citoscheletro (microtubuli, centrosoma, corpo basale), nel nucleo e nelle proiezioni cellulari (ciglia, dendriti, assoni), in linea con i suoi ruoli nella motilità cellulare, nella segnalazione e nel traffico proteico.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide sintetico derivato dagli amminoacidi 600–700 dell'HDAC6 umana, situato all'interno del secondo dominio catalitico. Questa regione è ben conservata e probabilmente contribuisce alla specificità dell'epitopo. Considerare l'utilizzo di questo anticorpo per rilevare sia l'HDAC6 a lunghezza intera che potenziali isoforme o frammenti di degradazione.
• Le applicazioni consigliate includono il Western blotting (WB) e l'ELISA in base ai dati del fornitore. Nel WB, è prevista una banda a ~131 kDa in condizioni standard riducenti. Validare in linee cellulari umane pertinenti (es. HeLa, HEK293) e ottimizzare la preparazione del lisato per preservare la stabilità dell'HDAC6.
• La reattività crociata è stata confermata per l'HDAC6 umana. Per l'uso con altre specie, verificare l'omologia di sequenza della regione immunogenica ed eseguire un esperimento pilota.
• Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo, il tempo di incubazione e il sistema di rilevamento in base alla propria configurazione sperimentale specifica. L'inclusione di appropriati controlli positivi e negativi è essenziale per confermare la specificità.

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