Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Heparanase 1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9Y251

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Heparanase

• L'Heparanase (HPSE, nota anche come HPA1, HPR1, HSE1, HPSE1) è un'endo-β-glucuronidasi che scinde specificamente i proteoglicani solfato di eparano (HSPG) in frammenti più piccoli, svolgendo un ruolo chiave nella degradazione e nel rimodellamento della matrice extracellulare (MEC).
• L'enzima mostra un'attività dipendente dal pH, essenzialmente inattivo a pH neutro ma altamente attivo in condizioni acide, come quelle riscontrate durante l'invasione tumorale, l'infiammazione e la guarigione delle ferite.
• L'Heparanase viene inizialmente sintetizzata come un precursore di 65 kDa che subisce un processo proteolitico per produrre un eterodimero maturo e attivo composto da subunità di 8 kDa e 50 kDa; l'enzima maturo si localizza principalmente nei lisosomi e può essere secreto.
• Studi di frazionamento subcellulare e di immunoistochimica mostrano l'Heparanase sulla membrana lisosomiale, nel nucleo e come proteina secreta, suggerendo ruoli versatili sia nei microambienti intracellulari che extracellulari.
• L'espressione tissutale è prominente nella placenta e nella milza, con livelli inferiori nei linfonodi, timo, leucociti del sangue periferico, midollo osseo, cellule endoteliali, fegato fetale e vari tessuti tumorali; all'interno dei follicoli piliferi, viene rilevata specificamente negli strati della guaina radicolare interna.
• Oltre alla sua funzione enzimatica, l'Heparanase modula l'adesione cellulare, promuove la fosforilazione di AKT1/PKB tramite i lipid rafts, regola positivamente l'angiogenesi mediata da VEGF attraverso l'attivazione di SRC e agisce come procoagulante potenziando l'attivazione del fattore X.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 36–275) corrisponde a una regione che probabilmente esclude il peptide segnale N-terminale, potenzialmente mirando alla forma matura dell'Heparanase; considerare di verificare la reattività sia con la forma pro- (~65 kDa) che con le subunità processate (50 kDa e 8 kDa) nelle proprie condizioni di saggio.
• Per il western blotting, preparare i lisati a pH neutro e considerare di eseguire un controllo positivo da tessuto di placenta o milza, dove l'espressione di HPSE è elevata; ci si aspetta una banda vicina a 61–65 kDa.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), testare l'anticorpo su sezioni incluse in paraffina o congelate di placenta, milza o xenotrapianti tumorali, che esprimono fortemente l'Heparanase, e includere un controllo isotipo.
• Per applicazioni ELISA, utilizzare come anticorpo di cattura o di rilevamento dopo aver confermato la compatibilità di accoppiamento; la proteina ricombinante Heparanase (ad esempio, l'immunogeno) può fungere da standard.

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