Anticorpo monoclonale anti-HER2/ErbB2 per FC - P04626

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di HER2/ErbB2

• HER2 (Recettore tirosin-chinasico erbB-2) è un membro della famiglia del recettore del fattore di crescita epidermico (EGFR/ErbB), codificato dal gene ERBB2. È anche noto come p185erbB2, CD340, HER-2/neu e proto-oncogene Neu.
• Funziona come una tirosin-chinasi proteica che forma eterodimeri con altri membri della famiglia ErbB, agendo come partner di dimerizzazione preferenziale. Svolge un ruolo critico nelle vie di trasduzione del segnale che regolano crescita, differenziazione e sopravvivenza cellulare.
• Nel citoplasma, HER2 regola la stabilizzazione e l'estensione dei microtubuli tramite la via di segnalazione MEMO1-RHOA-DIAPH1, che porta all'inibizione di GSK3B e all'associazione alla membrana di APC e CLASP2, cruciali per la cattura dei microtubuli.
• Nel nucleo, HER2 funziona come regolatore trascrizionale, legandosi direttamente al promotore di PTGS2/COX-2 per attivarne la trascrizione. Regola anche l'espressione di CDKN1A attraverso STAT3 e SRC e stimola la sintesi di rRNA da parte di RNA Pol I, promuovendo la sintesi proteica e la crescita cellulare.
• La localizzazione subcellulare è dinamica: principalmente sulla membrana cellulare, ma si trova anche negli endosomi precoci, citoplasma (regione perinucleare), nucleo e nelle proiezioni cellulari come le lamellipodia.
• Esso in vari tessuti tumorali, inclusi tumori mammari primari e cancri dell'intestino tenue, esofago, rene e bocca, segnandolo come un oncogene critico e un bersaglio terapeutico.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, glicosilazione e formazione di ponti disolfuro, essenziali per la sua attivazione e funzione come recettore chinasi transmembrana.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (aa 23-652) di HER2 umano, rendendo questo anticorpo adatto a rilevare HER2 espresso in superficie in cellule vive e non permeabilizzate mediante citometria a flusso.
• Per la colorazione intracellulare, considerare protocolli di permeabilizzazione delicati per accedere ai pool nucleari o citoplasmatici di HER2 preservando l'integrità dell'epitopo.
• Titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per i saggi FC, poiché un eccesso di anticorpo può aumentare il fondo o causare aggregazione.
• Includere sempre controlli isotipo appropriati e controlli a colorazione singola per garantire una corretta compensazione e gating.
• Proteggere il coniugato dalla luce ed evitare cicli di congelamento-scongelamento per mantenere la stabilità del fluoroforo e le prestazioni dell'anticorpo.

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