Anticorpo Monoclonale Anti-HER2/ErbB2 per Citometria a Flusso - P04626

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di HER2/ErbB2

• Identità Proteica e Isoforme: Tirosin chinasi proteica recettoriale erbB-2, nota anche come HER2, Neu, CD340 o p185erbB2. Codificata dal gene ERBB2, funziona come un critico recettore di superficie cellulare nelle vie di trasduzione del segnale che controllano la crescita e la differenziazione cellulare.
• Funzione Principale del Nucleosoma/Cromatina: Non è direttamente una proteina cromatinica, ma la segnalazione HER2 influenza i programmi di espressione genica. È un componente essenziale dei complessi recettoriali della neuregulina, sebbene le neureguline non leghino direttamente; invece, richiede un corecettore per l'interazione con il ligando. GP30 è un potenziale ligando.
• Regolazione dei Microtubuli: All'attivazione, HER2 innesca la via MEMO1-RHOA-DIAPH1, fosforilando e inibendo GSK3B. Ciò impedisce la fosforilazione di APC e CLASP2, consentendo la loro associazione di membrana e la successiva localizzazione di MACF1, che cattura e stabilizza i microtubuli periferici.
• Funzioni Nucleari: Si transloca nel nucleo dove agisce come regolatore trascrizionale. Si lega alla sequenza 5'-TCAAATTC-3' nel promotore PTGS2/COX-2 per attivare la trascrizione. Partecipa anche alla trascrizione di CDKN1A dipendente da STAT3 e SRC e migliora la sintesi dell'rRNA tramite RNA Pol I, promuovendo la traduzione proteica e la crescita cellulare.
• Localizzazione Subcellulare: Trovata alla membrana cellulare, nelle ruffles, nei endosomi precoci, nel citoplasma (regione perinucleare) e nel nucleo. Questa distribuzione dinamica riflette i suoi ruoli diversificati nella segnalazione di prossimità membranare e nella regolazione genica nucleare.
• Specificità Tessutale e Associazione Malattie: Espressa in vari tessuti tumorali, inclusi tumori mammari primari, e tumori del piccolo intestino, esofago, rene e cavità orale. L'amplificazione/sovraespressione è una caratteristica distintiva dei tumori aggressivi, rendendo HER2 un bersaglio chiave diagnostico e terapeutico.
• Modificazioni Post-traduzionali Chiave e Parole Chiave: Contiene un peptide segnale, un grande dominio extracellulare, un'elica transmembrana a passaggio singolo e un dominio tirosin chinasi intracellulare. Pesantemente glicosilata con legami disolfuro. L'autofosforilazione sui residui di tirosina è critica per l'attività chinasica. Le parole chiave includono legame ATP, chinasi, transferasi, glicoproteina, fosfoproteina, variante di malattia, proto-oncogene.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo è stato sviluppato contro una proteina ricombinante corrispondente al dominio extracellulare (amminoacidi 23‑652) di HER2 umano, rendendolo adatto per rilevare HER2 di superficie cellulare mediante citometria a flusso (FC) senza permeabilizzazione. Considerare di titolare l'anticorpo per ottimizzare il rapporto segnale/rumore per il modello cellulare specifico.
• Per i controlli positivi, utilizzare linee cellulari che sovraesprimono HER2 come SK‑BR‑3 o BT‑474. Validare la colorazione con un appropriato controllo di isotipo per confermare la specificità.
• Se è richiesta la rilevazione di HER2 intracellulare o totale, notare che la fissazione e la permeabilizzazione possono alterare l'accessibilità dell'epitopo. Validare l'anticorpo nelle condizioni del saggio e considerare la colorazione di cellule vive per bersagli solo di superficie.
• La reattività incrociata con specie diverse dall'uomo non è stata testata. Se si lavora con campioni non umani, confermare sperimentalmente la reattività.
• Includere sempre un colorante di vitalità per escludere le cellule morte, che possono aumentare il legame non specifico.

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