Anticorpo monoclonale rabbit Anti-HER2/ErbB2 per WB, IHC, IF - P04626

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di HER2/ErbB2

• Il recettore tirosina-chinasi erbB-2 (conosciuto anche come HER2, Neu, CD340) è un membro della famiglia dei recettori del fattore di crescita epidermico (EGFR) e funziona come oncogene in diversi tipi di cancro. Non possiede un ligando diretto conosciuto, ma agisce come corecettore formando complessi di segnalazione attivi con altri membri della famiglia EGFR dopo il legame con la neuregolina.
• HER2/ErbB2 svolge un ruolo fondamentale nella regolazione della crescita cellulare, della differenziazione e della sopravvivenza attraverso vie di segnalazione a valle, tra cui le cascate PI3K/AKT e RAS/RAF/MEK/ERK. Mediano anche la stabilizzazione dei microtubuli tramite la via MEMO1-RHOA-DIAPH1, influenzando la polarità e la migrazione cellulare.
• La proteina si localizza prevalentemente sulla membrana cellulare, ma dopo l'attivazione può traslocare nel nucleo, dove funziona come fattore di trascrizione. Si lega a sequenze promotorie specifiche (es. TCAAATTC) e regola geni come PTGS2/COX-2 e CDKN1A, aumentando la sintesi di rRNA e la crescita cellulare.
• La distribuzione subcellulare include membrana cellulare, membrane increspate, endosomi precoci, citoplasma, regione perinucleare e nucleo, riflettendo il suo traffico dinamico e i suoi ruoli multifunzionali.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, glicosilazione e formazione di legami disolfuro, essenziali per la sua stabilità, dimerizzazione e attività chinasi.
• Specificità tissutale: È altamente espresso in numerosi tessuti tumorali epiteliali, inclusi i tumori mammari primari, oltre che in tumori dell'intestino tenue, esofago, rene e cavità orale, il che lo rende un biomarcatore chiave e un bersaglio terapeutico.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende il dominio extracellulare (aa 23-652), consentendo la rilevazione di HER2/ErbB2 a lunghezza intera. Questa regione è comunemente bersagliata in molti anticorpi diagnostici e può fornire una specificità favorevole.
• Per il Western blotting, la banda attesa è di circa 138 kDa. Utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e validare con una linea cellulare di controllo positivo nota per sovraesprimere HER2, come SK-BR-3 o BT-474.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF-P), possono essere necessari metodi di recupero dell'antigene (ad esempio, tampone citrato pH 6.0, indotto dal calore). Titolare l'anticorpo per ottimizzare il rapporto segnale-rumore per il tuo tessuto specifico e il protocollo di fissazione.
• Per IHC multiplex (mIHC), verificare la compatibilità con altri anticorpi primari e sistemi di rilevazione. A causa della sua espressione robusta in alcuni tumori, considerare l'uso di una serie di diluizioni per evitare la diafonia tra canali.
• La reattività di questo anticorpo è stata validata per campioni umani; la reattività crociata con altre specie non è stata determinata e deve essere verificata sperimentalmente se necessaria.

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