Anticorpo policlonale di coniglio Anti-HER2/ErbB2 per WB, IHC-P, ELISA - P04626

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di HER2/ErbB2

• HER2/ErbB2 (recettore tirosin-protein chinasio erbB-2, noto anche come Neu, CD340, p185erbB2) è un membro della famiglia dei recettori del fattore di crescita epidermico (EGFR/ERBB), codificato dal proto-oncogene ERBB2. Funge da driver oncogenico in diversi tipi di cancro.
• La proteina agisce come corecettore essenziale all'interno dei complessi neuregulina-recettore: non ha capacità di legame diretto al ligando, ma media la trasduzione del segnale dopo eterodimerizzazione con altri membri della famiglia ERBB. L'attivazione innesca vie di segnalazione a valle, inclusa la cascata di segnalazione MEMO1-RHOA-DIAPH1, che inibisce GSK3B, portando alla cattura e stabilizzazione dei microtubuli alla periferia cellulare.
• Nel nucleo, HER2/ErbB2 funge da regolatore trascrizionale. Si lega al promotore di PTGS2/COX-2 sulla sequenza 5'-TCAAATTC-3' per attivare la trascrizione ed è implicato nell'attivazione trascrizionale di CDKN1A tramite STAT3 e SRC. Inoltre, aumenta la trascrizione dell'rRNA da parte della RNA polimerasi I, promuovendo la sintesi proteica e la crescita cellulare.
• Subcellularmente, HER2/ErbB2 si localizza principalmente sulla membrana cellulare, incluse le membrane delle rufflature, e viene trasportato attraverso gli endosomi precoci. Si trova anche nel citoplasma, nella regione perinucleare e nel nucleo, a conferma dei suoi ruoli dinamici nella segnalazione e nella regolazione.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione, fosforilazione e formazione di legami disolfuro, coerenti con la sua natura di recettore tirosin chinasio. La proteina possiede domini di legame all'ATP e domini chinasio fondamentali per l'attività enzimatica.
• HER2/ErbB2 è sovraespresso in un'ampia gamma di tessuti tumorali, in particolare tumori della mammella, dell'intestino tenue, dell'esofago, del rene e orali. La sua sovraespressione tessuto-specifica lo rende un biomarcatore clinico chiave e un bersaglio terapeutico.
• La scheda UniProt annota HER2/ErbB2 con caratteristiche quali l'inizio alternativo, lo splicing alternativo, il riarrangiamento cromosomico e varianti patologiche, che sottolineano la sua importanza nella biologia del cancro.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'anticorpo policlonale è stato prodotto contro un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 1156–1255, corrispondenti al dominio intracellulare C-terminale di HER2/ErbB2 umano. Questa regione è conservata tra uomo, topo e ratto, e supporta la reattività crociata osservata.
• Per il Western blotting è prevista una banda vicina a 138 kDa. Utilizzare lisati di controllo positivo da linee cellulari che sovraesprimono HER2 (ad esempio SK-BR-3, BT-474) e validare con controlli negativi appropriati.
• Nell'immunoistochimica (paraffina), considerare i metodi di recupero dell'antigene e la validazione utilizzando sezioni di carcinoma mammario HER2-positive note. Il segnale può essere membranoso, citoplasmatico o entrambi, a seconda della fissazione e delle caratteristiche del tumore.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento contro la proteina o il peptide ricombinante di HER2/ErbB2; l'accostamento a un anticorpo monoclonale ben caratterizzato può migliorare le prestazioni del test.
• È raccomandata l'ottimizzazione dei fattori di diluizione e delle condizioni di incubazione per tutte le applicazioni.

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