Anticorpo Monoclonale Anti-HFE per WB, ELISA - Q30201

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'HFE

• L'HFE (Proteina dell'Emocromatosi Ereditaria), indicato anche come HLA-H, è una proteina di membrana che si lega al recettore della transferrina (TFR) e riduce la sua affinità per la transferrina caricata di ferro, regolando così l'assorbimento del ferro.
• Il gene che codifica per l'HFE appartiene alla famiglia MHC di classe I; le mutazioni dell'HFE sono associate all'emocromatosi ereditaria, un disturbo da sovraccarico di ferro, coerente con la sua classificazione come variante proteica di malattia.
• Secondo UniProt, l'HFE è espresso in tutti i tessuti testati tranne che nel cervello, indicando una distribuzione ampia ma non ubiquitaria.
• A livello subcellulare, l'HFE si localizza sulla membrana cellulare, dove interagisce con il TFR e altre proteine correlate al ferro per controllare l'omeostasi sistemica del ferro.
• Lo splicing alternativo dell'HFE produce multiple isoforme, che possono avere distribuzioni tissutali e ruoli funzionali distinti; la forma legata alla membrana a lunghezza intera è la specie primaria.
• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione e la formazione di legami disolfuro, che sono critiche per il corretto ripiegamento e l'espressione sulla superficie cellulare.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 249–348 dell'HFE umano, una regione che include parte del dominio extracellulare, l'elica transmembrana e la coda citoplasmatica. Questa progettazione può consentire il rilevamento sia della forma a lunghezza intera che di certe forme troncate nel Western blot denaturante.
• Per il Western blotting, considerare l'uso di lisati proteici totali da tessuti che esprimono l'HFE come il fegato o la placenta (escludendo il cervello, dove l'HFE è assente). Ottimizzare le condizioni di blocco e la diluizione dell'anticorpo per il tipo di campione specifico.
• Per le applicazioni ELISA, le prestazioni dell'anticorpo possono dipendere dal formato del saggio (diretto, indiretto o sandwich). Validare il clone nella matrice del campione target e considerare l'abbinamento con un anticorpo di cattura che riconosca un epitopo distinto.
• Dato che l'HFE è una proteina di membrana, assicurare una corretta solubilizzazione e denaturazione durante la preparazione del campione per esporre l'epitopo, particolarmente se l'immunogeno è parzialmente intracellulare.
• La reattività incrociata è riportata per l'HFE umano; per l'uso con altre specie, deve essere verificata l'omologia di sequenza.

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