Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-HHLA2 per WB, IHC-P ed ELISA - Q9UM44

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di HHLA2

• HHLA2 (noto anche come B7-H7, B7y, B7-H5) è un membro della famiglia B7 di ligandi immunoregolatori, caratterizzato da un dominio immunoglobulina, legami disolfuro e motivi di glicosilazione.
• Funziona come molecola costimolatoria sulle cellule presentanti l'antigene, interagendo con TMIGD2 sui linfociti T per potenziare l'attivazione mediata dal TCR, la proliferazione e la produzione di citochine attraverso una cascata di segnalazione dipendente da AKT.
• HHLA2 è una glicoproteina transmembrana di tipo I a passaggio singolo localizzata sulla superficie cellulare, con un peptide segnale, domini extracellulari simili a Ig, un'elica transmembrana e una coda citoplasmatica.
• È espresso in vari tessuti, tra cui colon, rene, testicolo, polmone e pancreas, e a livelli più bassi nell'intestino tenue, fegato e muscolo scheletrico. Nelle cellule immunitarie, è altamente espresso nelle cellule B, nelle cellule dendritiche e nei macrofagi, ma non rilevato nei linfociti T.
• La proteina subisce splicing alternativo, producendo più isoforme che possono differire nelle proprietà funzionali.
• Le modificazioni post-traduzionali chiave includono la glicosilazione N-legata e la formazione di legami disolfuro, fondamentali per la sua stabilità strutturale e le interazioni ligando-recettore.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno, corrispondente al dominio extracellulare (aa 30-200), è stato progettato per generare anticorpi che riconoscano HHLA2 nativo, potenzialmente adatti per rilevare la proteina espressa in superficie in IHC-P e la proteina totale in WB.
• Per il western blot, considerare l'uso di condizioni riducenti per risolvere le strutture legate da disolfuri; il peso molecolare previsto è ~47 kDa, che può apparire più alto a causa della glicosilazione.
• Convalidare la specificità dell'anticorpo in linee cellulari umane o tessuti pertinenti noti per esprimere HHLA2 (es. colon, rene), utilizzando controlli negativi (es. linfociti T) per confermare l'assenza di reattività incrociata.
• In ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; stabilire le condizioni ottimali di coating e bloccaggio sperimentalmente.

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