Anticorpo policlonale di coniglio anti-HIF1α per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16665

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di HIF1α

• HIF1α (fattore 1-alfa inducibile dall'ipossia) è un regolatore principale della risposta adattativa cellulare e sistemica all'ipossia, codificato dal gene HIF1A (noto anche come BHLHE78, MOP1, PASD8). Riferimenti correlati: PMID:11292861, PMID:11566883, PMID:15465032

• In condizioni di ipossia, HIF1α dimerizza con ARNT e si lega agli elementi di risposta all'ipossia (HRE) per attivare la trascrizione di oltre 40 geni bersaglio coinvolti nell'apporto di ossigeno, nell'angiogenesi e nella riprogrammazione metabolica (ad es. EPO, VEGF, enzimi glicolitici). Riferimenti correlati: PMID:11292861, PMID:11566883, PMID:15465032

• L'eterodimero HIF1α-ARNT recluta coattivatori trascrizionali quali CREBBP ed EP300 per avviare l'espressione dei geni bersaglio. Riferimenti correlati: PMID:16543236, PMID:9887100

• Svolge un ruolo critico nella vascolarizzazione embrionale, nell'angiogenesi tumorale e nella fisiopatologia delle malattie ischemiche. Riferimenti correlati: PMID:22009797

• La localizzazione subcellulare è principalmente citoplasmatica in condizioni di normossia; dopo la stabilizzazione indotta dall'ipossia, HIF1α trasloca nel nucleo e negli speckle nucleari per svolgere le sue funzioni trascrizionali.

• HIF1α è soggetto a molteplici modifiche post-traduzionali, tra cui idrossilazione, acetilazione, fosforilazione, S-nitrosilazione e ubiquitinazione, che regolano strettamente la sua stabilità e attività trascrizionale.

• Espresso nella maggior parte dei tessuti umani con livelli più elevati nel rene e nel cuore, HIF1α è frequentemente sovraespresso in un'ampia gamma di tumori e nelle relative metastasi a causa dell'ipossia intratumorale e delle mutazioni oncogeniche.

• Durante l'infezione da SARS-CoV-2, HIF1α è necessario per l'induzione della glicolisi nei monociti, favorendo uno stato pro-infiammatorio e la replicazione virale. Riferimenti correlati: PMID:32697943

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 400–500 di HIF1α umano (NP_001521.1), il che può contribuire alla reattività crociata con gli ortologhi di topo e ratto.
• Per il Western blot (WB), HIF1α migra tipicamente a 93–96 kDa; possono essere osservate bande aggiuntive corrispondenti a isoforme di splicing o forme modificate. Validare nel sistema di campioni pertinente, preferibilmente utilizzando stimoli ipossici per aumentare l'espressione del target.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), si raccomanda di ottimizzare la fissazione, il recupero antigenico e l'amplificazione del segnale. Si consiglia di includere campioni di tessuto ipossico come controlli positivi.
• Come per tutti gli anticorpi policlonali, è necessario verificare la coerenza tra i diversi lotti e si consiglia di eseguire test preliminari per confermare l'idoneità alle condizioni specifiche del proprio saggio.

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