Anticorpo monoclonale di coniglio anti-HIF1AN/FIH-1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9NWT6

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Sfondo Biologico: Funzione e Localizzazione di HIF1AN (Fattore Inibente HIF-1)

• HIF1AN (Fattore inibente HIF-1), noto anche come FIH-1 o idrossilasi dell'asparagina del fattore inducibile da ipossia, è una diossigenasi dipendente dall'ossigeno di 40,3 kDa codificata dal gene HIF1AN (GeneID 55662).
• Idrossila principalmente HIF-1 alpha a Asn-803 nel dominio di transattivazione C-terminale (CAD) in condizioni normossiche, impedendo l'interazione con coattivatori trascrizionali come CBP/p300, regolando così la risposta ipossica.
• Oltre a HIF-1α, FIH-1 idrossila residui specifici di asparagina, aspartato e istidina all'interno dei domini di ripetizione di ankirina (ARD) di varie proteine, tra cui NFKB1, NFKBIA, NOTCH1, ASB4 e TNKS2.
• FIH-1 è localizzato prevalentemente nel nucleo e nel citoplasma, con arricchimento nella regione perinucleare, coerente con i suoi ruoli duali nella regolazione trascrizionale e nella segnalazione citoplasmatica.
• Attraverso l'idrossilazione di NOTCH1, FIH-1 regola negativamente l'attività di NOTCH1, accelerando così la differenziazione miogenica; al contrario, regola positivamente ASB4 per promuovere la differenziazione vascolare.
• La proteina contiene domini di legame del ferro e catalitici di diossigenasi, e la sua attività è modulata dall'acetilazione, evidenziando il suo ruolo come sensore chiave che collega la disponibilità di ossigeno agli esiti trascrizionali.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 1–349, coprendo la proteina FIH-1 a lunghezza intera; ciò può elicitarerecognizione di epitopi simile a policlonale, supportando un rilevamento robusto in multiple applicazioni. Per Western blot, si prevede una banda intorno a 41 kDa in condizioni riducenti/denaturanti; considerare di includere sia lisati cellulari normossici che ipossici per valutare l'espressione endogena.
• In immunoistochimica (IHC-P) e immunofluorescenza (IF/ICC), i protocolli di recupero dell'antigene potrebbero richiedere ottimizzazione; i tessuti di controllo con espressione nota elevata di FIH-1 (ad es., rene, fegato) dovrebbero essere validati insieme a campioni knockout o trattati con siRNA.
• Per ELISA, si consiglia l'accoppiamento con un anticorpo di rilevamento contro un epitopo distinto; assicurarsi che le curve standard includano proteina HIF1AN ricombinante (a lunghezza intera o frammento) per confermare la specificità del saggio.

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