Anticorpo policlonale coniglio anti-HIF1AN/FIH1 [Validato KO] per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q9NWT6

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di HIF1AN

• L'inibitore alfa 1 del fattore inducibile da ipossia (HIF1AN), noto anche come Fattore inibente HIF-1 (FIH-1) e asparagina idrossilasi del fattore inducibile da ipossia, è un enzima diossigenasi.
• HIF1AN idrossila HIF-1 alfa all'asparagina-803 nel dominio C-terminale di transattivazione, agendo come sensore di ossigeno per regolare la risposta ipossica.
• In condizioni normossiche, questa idrossilazione impedisce l'interazione di HIF-1 con coattivatori trascrizionali come CBP/p300, sopprimendo così l'espressione dei geni inducibili da ipossia.
• Oltre a HIF, HIF1AN idrossila residui di asparagina, aspartato e istidina all'interno dei domini di ripetizione ankirina di diversi substrati (es. NFKB1, NOTCH1, ANK1, TNKS2), influenzando molteplici vie di segnalazione.
• Regola negativamente l'attività di NOTCH1, accelerando la differenziazione miogenica, e regola positivamente l'attività di ASB4 per promuovere la differenziazione vascolare.
• HIF1AN si localizza prevalentemente nel nucleo ma si trova anche nel citoplasma e nella regione perinucleare.
• Parole chiave aggiuntive includono diossigenasi, legante del ferro, legante dei metalli, ossidoreduttasi e acetilazione, riflettendo le sue proprietà catalitiche e regolatorie.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 1-349, quasi a lunghezza intera) può generare anticorpi policlonali che riconoscono più epitopi, potenzialmente migliorando la sensibilità di rilevamento.
• Per il Western blot, prevedere una banda specifica vicino a 41 kDa; la convalida tramite knockout (KO) è fortemente raccomandata per confermare la specificità dell'anticorpo.
• In IHC-P, ottimizzare il recupero dell'antigene (es. tampone citrato pH 6.0) e validare la colorazione in campioni di tessuto pertinenti.
• Per IF/ICC, fissare le cellule con paraformaldeide e permeabilizzare con Triton X-100; confermare la colorazione in cellule di controllo positive appropriate.
• Per IP, utilizzare perle standard di agarosio Protein A/G per IgG di coniglio; includere un controllo isotipo IgG.
• Per ELISA, titolare l'anticorpo come reagente di cattura o rilevamento e validare nella matrice di campione pertinente.
• La reattività crociata riportata con topo e ratto suggerisce epitopi conservati; verificare comunque l'allineamento della sequenza della specie per la tua applicazione specifica.

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