Anticorpo policlonale anti-HINT1 di coniglio per WB, IF/ICC, ELISA - P49773

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di HINT1

• HINT1 (Proteina legante i nucleotidi con triade istidinica 1), nota anche come Inibitore 1 della proteina chinasi C (PKCI-1), è un enzima ubiquitariamente espresso appartenente alla superfamiglia delle triadi istidiniche (HIT).
• Funziona principalmente come adenosina 5'-monofosfoamidasi, idrolizzando una varietà di substrati tra cui fosforamidati di nucleotidi purinici (AMP-NH2, AMP-morfolidato, GMP-morfolidato), coniugati amminoacil-AMP (lisil-AMP, Met-AMP, His-AMP, Asp-AMP, lisil-GMP) e fosforamidati di triptamina fluorogenici. Riferimenti correlati: PMID:15703176 PMID:16835243 PMID:17217311 PMID:17337452 PMID:22329685 PMID:23614568
• Può anche convertire l'adenosina/guanosina 5'-O-fosforotioato in nucleosidi 5'-fosfato con rilascio di H2S. Riferimenti correlati: PMID:30772266
• Oltre alla sua attività enzimatica, HINT1 agisce come una proteina impalcatura che modula l'attivazione trascrizionale da parte del complesso LEF1/TCF1-CTNNB1 e del complesso MITF/CTNNB1, implicandolo nelle vie di segnalazione Wnt e MITF. Riferimenti correlati: PMID:16014379 PMID:22647378
• Influisce sull'apoptosi modulando i livelli della proteina p53/TP53 e l'apoptosi mediata da p53, e può regolare la degradazione proteasomica delle proteine bersaglio attraverso il complesso ligasi E3 ubiquitina SCF. Riferimenti correlati: PMID:16835243 PMID:19112177
• HINT1 mostra anche attività isopeptidasi specifica per SUMO, deconiugando SUMO1 da substrati come RGS17 e RANGAP1, indicando un ruolo nella dinamica della SUMOilazione. Riferimenti correlati: PMID:31088288
• A livello subcellulare, si trova sia nel citoplasma che nel nucleo, coerente con le sue diverse funzioni nel metabolismo dei nucleotidi e nella regolazione trascrizionale.
• Le mutazioni in HINT1 sono associate a neuropatia assonale autosomica recessiva con neuromiotonia, evidenziando la sua rilevanza clinica nelle malattie neurologiche.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla proteina HINT1 umana a lunghezza intera (amminoacidi 1-126), suggerendo che l'anticorpo può riconoscere la conformazione nativa della proteina oltre alle forme denaturate.
• Sulla base della sua reattività validata con campioni umani, di topo e di ratto, questo anticorpo è adatto per studi interspecie; verificare le prestazioni in modelli specifici.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di ~14kDa; utilizzare la percentuale appropriata di gel e controlli di carico per confermare la specificità.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione per garantire la penetrazione e la conservazione dell'antigenicità, e includere appropriati controlli negativi.
• Nell'ELISA, abbinare a un anticorpo di rilevamento abbinato o a un sistema di substrato; validare il saggio con controlli positivi/negativi noti per stabilire sensibilità e specificità.

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