Anticorpo policlonale anti-istone H1t per WB, IHC-P, ELISA - P22492

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione dell'istone H1t

• L'istone H1t, noto anche come istone H1 testicolare, è un istone linker specifico del testicolo che si lega ai nucleosomi e facilita la compattazione della cromatina di ordine superiore (probabile).
• A differenza degli altri sottotipi H1, H1t forma una cromatina meno compatta, il che si ritiene favorisca la ricombinazione omologa durante la meiosi (PubMed:26757249). Riferimenti correlati: PMID:26757249
• Codificato dal gene H1-6 (precedentemente HIST1H1T), H1t è classificato tra le varianti dell'istone H1 indipendenti dalla replicazione, che presentano pattern di espressione specifici dei tessuti.
• A livello subcellulare, H1t si localizza nel nucleo ed è associato ai cromosomi, in linea con il suo ruolo di proteina strutturale legante il DNA.
• H1t è soggetto a molteplici modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione e citrullinazione, che possono regolarne la dinamica di legame alla cromatina (parole chiave).
• In quanto marcatore dello sviluppo e della differenziazione, l'espressione di H1t è strettamente correlata alla spermatogenesi e funge da indicatore delle fasi meiotiche e post-meiotiche nel testicolo.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato è un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 150-207 dell'istone H1t umano (regione C-terminale). Questo design può consentire il rilevamento dell'H1t a lunghezza intera e potenzialmente evidenziare modifiche o isoforme specifiche della regione C-terminale. Per un'identificazione non ambigua delle isoforme, si consiglia di abbinarlo a un anticorpo specifico per la regione N-terminale.
• Per le applicazioni di Western blot, si raccomanda l'utilizzo di estratti nucleari di tessuto testicolare o di linee cellulari note per esprimere H1t (ad es. spermatociti), insieme a controlli di caricamento appropriati e marcatori di peso molecolare per confermare la banda di circa 22 kDa.
• Nell'immunoistochimica su paraffina (IHC-P), le sezioni di testicolo rappresentano controlli positivi ideali grazie all'espressione specifica del tessuto. Le condizioni di recupero antigenico possono influenzare la colorazione; ottimizzare utilizzando tamponi standard a base di citrato o EDTA e validare con tessuti positivi/negativi noti.
• Data la reattività crociata con topo e ratto, questo anticorpo può essere utilizzato in modelli roditori; tuttavia, si consiglia un allineamento della sequenza della regione immunogena tra le specie per prevedere i pattern di riconoscimento.
• Le prestazioni nell'ELISA devono essere verificate mediante il rivestimento con il peptide immunizzante o con la proteina H1t ricombinante e confrontando i rapporti segnale/rumore con controlli in bianco appropriati.

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