Anticorpo monoclonale anti-istone H2B (specifico del testicolo) per WB, IP, IHC - Q96A08

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione dell'istone H2B di tipo 1-A

• L'istone H2B di tipo 1-A (H2BC1, noto anche come TSH2B.1/hTSH2B) è una variante istonica specifica del testicolo che sostituisce l'istone H2B classico durante la spermatogenesi.
• Dirige specificamente la trasformazione dei nucleosomi in dissociazione in protamina nelle cellule germinali maschili, agendo come fattore di dissociazione dei nucleosomi per creare una cromatina dinamica che facilita lo scambio su larga scala degli istoni (per similarità).
• In quanto componente essenziale del nucleosoma, avvolge e compatta il DNA nella cromatina, svolgendo un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica (per similarità).
• L'accessibilità del DNA è regolata attraverso un insieme complesso di modifiche post-traduzionali (codice istonico) e il rimodellamento dei nucleosomi (per similarità).
• L'istone H2B di tipo 1-A è espresso anche in alcune cellule adipose; la sua funzione e le modifiche post-traduzionali specifiche in queste cellule restano poco chiare (PubMed:21249133). Riferimenti correlati: PMID:21249133
• La localizzazione subcellulare è limitata al nucleo e ai cromosomi.
• Le modifiche post-traduzionali note includono acetilazione, metilazione, fosforilazione, formazione di legami isopeptidici e coniugazione simile all'ubiquitina.
• Sebbene sia espresso prevalentemente nel testicolo e negli spermatozoi maturi (a livello proteico), è rilevato anche in alcune cellule adipose.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-100) dell'istone H2B umano di tipo 1-A; pertanto, è probabile che l'anticorpo rilevi un epitopo in questa regione, conservato tra le specie previste come reattive crociate.
• Per il Western blot, è prevista una banda a circa 14 kDa; si consiglia di validare il risultato in un sistema di campioni pertinente, come un lisato di testicolo umano o altri tessuti che esprimono questa variante.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF-P), si consiglia di utilizzare sezioni di tessuto testicolare, dove l'espressione è massima; potrebbe essere necessaria l'ottimizzazione del recupero antigenico.
• Per l'immunoprecipitazione (IP), utilizzare un estratto nucleare di testicolo o di cellule che esprimono il bersaglio; se pertinente, confermare le interazioni con i fattori di scambio delle protamine.
• Poiché questa variante istonica è presente anche in alcune cellule adipose, i ricercatori possono rilevare bande o segnali di colorazione nel tessuto adiposo o in colture di adipociti; si consiglia di utilizzare controlli appropriati per verificare la specificità.

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