Anticorpo policlonale coniglio anti-Histone H3 per WB, IHC-P, IP, ELISA, ChIP - Q16695 / P68431

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'Histone H3

• L'Histone H3.1t (noto anche come H3.4, H3/g) è un componente principale del nucleosoma, che avvolge e compatta il DNA nella cromatina, limitando l'accessibilità del DNA ai macchinari cellulari che richiedono il DNA come stampo. Questo svolge un ruolo centrale nella regolazione della trascrizione, nella riparazione del DNA, nella replicazione del DNA e nella stabilità cromosomica.
• I nucleosomi sono costituiti da due copie di ciascuna istone core (H2A, H2B, H3, H4). L'Histone H3 è parte integrante dell'ipotesi del codice delle istoni, in cui le sue diverse modificazioni post-traduzionali (acetilazione, metilazione, fosforilazione, ecc.) governano la struttura della cromatina e l'espressione genica.
• Codificato dal gene H3-4 (HIST3H3), questa variante istonica specifica per i testicoli è un membro della famiglia delle istoni H3 dipendenti dalla replicazione, con espressione limitata principalmente alle cellule testicolari.
• La proteina si localizza strettamente nel nucleo ed è associata ai cromosomi, coerentemente con il suo ruolo nell'organizzazione della cromatina.
• Le principali modificazioni post-traduzionali includono acetilazione, metilazione, fosforilazione, citrullinazione, ADP-ribosilazione e ubiquitinazione, riflettendo la sua regolazione dinamica durante il ciclo cellulare e lo sviluppo.
• Possiede attività di legame al DNA, contribuendo alla formazione di strutture cromatiniche di ordine superiore e ai meccanismi di ereditarietà epigenetica.
• Con un peso molecolare calcolato di circa 15,5 kDa (UniProt) e osservato a 15 kDa, migra come una tipica istone core in SDS-PAGE.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è stato progettato contro un peptide che copre gli amminoacidi 50-136 dell'HIST3H3 umano, una regione probabilmente esposta nel contesto del nucleosoma; considerare l'utilizzo di questo anticorpo in applicazioni come WB, IHC-P, IP, ELISA e ChIP come indicato.
• Data l'ampia reattività incrociata prevista, convalidare l'anticorpo nella vostra specifica specie e tessuto di interesse, in particolare per campioni non umani.
• L'Histone H3 è altamente conservato tra le specie; considerare una potenziale reazione incrociata con altre varianti H3 se è richiesta una discriminazione precisa della variante.
• Ottimizzare la concentrazione dell'anticorpo mediante titolazione per ogni applicazione, poiché le prestazioni possono variare tra i saggi. Per ChIP, assicurarsi che vengano impiegate adeguate condizioni di crosslinking e di frammentazione.
• Per il western blotting, gli estratti totali di istoni o istoni estratti con acido possono fornire segnali più puliti a causa della natura basica della proteina.

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