PolymAb® Rabbit contro Istone H4 per WB, IF/ICC, IHC-P, ChIP, ELISA - P62805

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Istone H4

• L'istone H4 è una delle quattro proteine istoniche centrali (H2A, H2B, H3, H4) che formano l'ottamero del nucleosoma, avvolgendo circa 147 bp di DNA e compattando il genoma nella cromatina.
• Come componente centrale del nucleosoma, H4 svolge un ruolo fondamentale nella regolazione dell'accessibilità del DNA per trascrizione, replicazione e riparazione, e nel mantenimento della stabilità cromosomica.
• Negli esseri umani, H4 è codificato da 14 geni quasi identici (H4C1–H4C16) raggruppati in diversi loci cromosomici, che producono una proteina conservata di 103 amminoacidi.
• H4 si localizza esclusivamente nel nucleo e sui cromosomi, dove è soggetto a estese modifiche post-traduzionali (acetilazione, metilazione, fosforilazione, citrullinazione, ubiquitinazione, ecc.) che costituiscono il "codice istonico" per regolare la dinamica della cromatina.
• Le modifiche sulla coda N-terminale (aa 1–20) sono fondamentali per la regolazione genica; per esempio, l'acetilazione su specifiche lisine è correlata alla trascrizione attiva, mentre la metilazione può segnalare sia attivazione che repressione a seconda della residuo.
• Alterazioni nei geni di H4 o nei marcatori regolatori sono collegate a patologie; mutazioni rare causano fenotipi neurodevlopmentali tra cui la disabilità intellettiva, evidenziando la natura essenziale dell'istone H4 nello sviluppo.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno bersaglia gli amminoacidi 1–100, comprendendo la coda N-terminale e il dominio globulare; tieni conto che il riconoscimento dell'epitopo N-terminale può essere influenzato da fitte modifiche post-traduzionali in alcuni contesti cromatici.
• Per Western blot (WB) è attesa una banda forte a ~11 kDa; includi campioni di istoni estratti con acido come controllo positivo per arricchire le proteine basiche.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC) e nell'immunoistochimica (IHC-P), la cromatina compatta nelle regioni eterocromatiche può mascherare l'epitopo; una digestione delicata con DNasi o protocolli di permeabilizzazione morbida possono migliorare la rilevazione.
• Per l'immunoprecipitazione della cromatina (ChIP), convalida la capacità dell'anticorpo di arricchire nucleosomi modificati rispetto a quelli non modificati in condizioni di cross-linking e native, poiché l'accessibilità all'epitopo varia con la compattazione della cromatina.
• La reattività crociata con topo e ratto è attesa grazie all'elevata conservazione della sequenza (H4 di uomo e topo sono identici); tuttavia, conferma sempre la specificità nella specie e nell'applicazione di interesse.

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