Anticorpo policlonale anti-HK1 per WB, ELISA - P19367

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di HK1

• L'esochinasi-1 (HK1), nota anche come HK I o esochinasi della forma cerebrale, è un enzima glicolitico chiave che catalizza la fosforilazione ATP-dipendente del D-glucosio in D-glucosio 6-fosfato, il primo passaggio limitante della velocità della glicolisi.
  Riferimenti correlati: PMID:1637300, PMID:25316723, PMID:27374331
• HK1 presenta un'ampia specificità di substrato e fosforila D-glucosamina, D-fruttosio, D-mannosio e 2-deossi-D-glucosio, ma non agisce sulla N-acetil-D-glucosamina.
• Nell'immunità innata, HK1 funziona come recettore citosolico di riconoscimento dei pattern per il peptidoglicano batterico; la porzione N-acetil-D-glucosamina inibisce l'attività di HK1 e ne induce il rilascio dai mitocondri, portando all'attivazione dell'inflammasoma NLRP3.
  Riferimenti correlati: PMID:27374331
• A livello subcellulare, HK1 è prevalentemente ancorata alla membrana esterna dei mitocondri ed è presente anche nel citosol.
• L'enzima è soggetto a modificazioni post-traduzionali regolatorie, tra cui acetilazione e fosforilazione, e contiene domini di legame per ATP e nucleotidi caratteristici delle chinasi allosteriche.
• Le isoforme specifiche dei tessuti derivano dallo splicing alternativo: l'isoforma 2 è specifica degli eritrociti, mentre le isoforme 3 e 4 sono specifiche dei testicoli.
• Le varianti genetiche di HK1 sono associate a diverse patologie, come la malattia di Charcot-Marie-Tooth, l'anemia emolitica ereditaria, la retinite pigmentosa e la disabilità intellettiva.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot (WB), si prevede una banda vicina al peso molecolare calcolato di 102 kDa. Convalidare il rilevamento in lisati di tessuti o cellule umani, murini o di ratto pertinenti che esprimono HK1.
• L'immunogeno (amminoacidi 20–300) è diretto verso la regione N-terminale; tenerne conto nella progettazione di esperimenti di competizione o di mappatura degli epitopi.
• A causa della natura policlonale, possono comparire alcune bande aspecifiche; ottimizzare le condizioni di blocco e la diluizione dell'anticorpo primario per il proprio sistema sperimentale specifico.
• Per l'ELISA, questo anticorpo può essere valutato come reagente di cattura o di rilevamento; convalidarlo rispetto alla proteina HK1 ricombinante o a campioni positivi noti.

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