Anticorpo policlonale coniglio Anti-HLA-DPB1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P04440

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di HLA-DPB1

• HLA-DPB1 (noto anche come DPB1, HLA-DP1B) codifica la catena beta dell'antigene di istocompatibilità HLA di classe II DP, che si accoppia con la catena alfa (HLA-DPA1) per formare un eterodimero funzionale MHC di classe II sulle cellule presentanti l'antigene.
• L'eterodimero lega peptidi di 10-30 residui derivati da antigeni esogeni che sono stati endocitati e processati nella via endosomiale/lisosomiale, e li presenta alle cellule T helper CD4+, svolgendo un ruolo centrale nell'immunità adattativa.
• L'assemblaggio della molecola MHC di classe II avviene nel reticolo endoplasmatico con la catena invariante (CD74), seguito dal trasporto verso i compartimenti endosomiali dove CD74 viene rimossa proteoliticamente, lasciando CLIP, che viene poi scambiato con peptidi antigenici facilitato da HLA-DM.
• La localizzazione subcellulare include la membrana cellulare, il reticolo endoplasmatico, l'apparato di Golgi, la rete trans-Golgi, gli endosomi e i lisosomi, che riflette il suo percorso di traffico e di caricamento dei peptidi.
• Le modifiche post-traduzionali includono la formazione di legami disolfuro e la glicosilazione N-linked, che sono fondamentali per la sua stabilità strutturale e la sua funzione.
• Come molecola MHC di classe II, HLA-DPB1 è fondamentale nella sorveglianza immunitaria, nella biologia dei trapianti e nelle associazioni con malattie autoimmuni; è anche espresso nelle cellule epiteliali gastrointestinali che agiscono come APC non professionali.
• La proteina ha un peso molecolare previsto di circa 29 kDa (forma matura dopo la scissione del peptide segnale).

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente ai residui 40-100 di HLA-DPB1 umano; si prevede che questa regione si trovi all'interno del dominio extracellulare, suggerendo che l'anticorpo possa rilevare MHC II espresso sulla superficie.
• Nel Western blotting in condizioni riducenti, aspettarsi una banda vicino a 29 kDa; tuttavia, a causa della glicosilazione e della possibile dimerizzazione, si possono osservare bande aggiuntive; si consiglia di utilizzare un blocco appropriato e una validazione approfondita.
• Per l'immunohistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare i metodi di recupero dell'antigene (ad esempio, il recupero epitopico indotto da calore) e la diluizione dell'anticorpo; la fissazione del tessuto può influenzare l'accessibilità dell'epitopo.
• L'anticorpo reagisce in modo crociato con topo e ratto, indicando epitopi conservati; questo può essere sfruttato per studi ortologhi in modelli di roditori, ma la reattività crociata deve essere verificata sperimentalmente.
• Per l'ELISA, accoppiare questo anticorpo policlonale con un anticorpo di cattura o un target antigenico adatto; testare diversi buffer di rivestimento e concentrazioni di anticorpo per stabilire le condizioni ottimali.

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