Anticorpo Monoclonale Anti-HLA-DQA1 per WB, IHC-P, ELISA - P01909

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di HLA-DQA1

• HLA-DQA1 codifica la catena alfa della molecola HLA-DQ (MHC di classe II), un eterodimero composto da subunità alfa (DQA1) e beta (DQB1) trovato sulle cellule presentanti l'antigene (APC) e su certe cellule epiteliali.
• Come molecola classica di MHC di classe II, l'eterodimero DQ presenta antigeni peptidici esogeni (10–30 residui) che sono stati internalizzati tramite la via endocitica alle cellule T helper CD4+, svolgendo così un ruolo centrale nell'immunità adattativa.
• Nel reticolo endoplasmatico, l'eterodimero DQA1/DQB1 si assembla con il trimero della catena invariante (CD74), formando un complesso nonamerico che viene trasportato agli endosomi e ai lisosomi dove il CD74 viene degradato sequenzialmente, lasciando il frammento CLIP che viene scambiato con peptidi antigenici facilitato da HLA-DM.
• HLA-DQA1 è una glicoproteina transmembrana con una topologia di membrana di tipo I tipica, contenente un dominio extracellulare di legame del peptide, un dominio simile a immunoglobulina, un'elica transmembrana a passaggio singolo e una breve coda citoplasmatica.
• A livello subcellulare, la proteina traffica attraverso la membrana del RE, il Golgi, la rete trans-Golgi, le membrane endosomali/lisosomiali e risiede infine sulla membrana plasmatica, riflettendo il suo ruolo dinamico nella lavorazione e presentazione degli antigeni.
• Le parole chiave di UniProt (P01909) evidenziano il suo coinvolgimento essenziale nell'immunità adattativa, nella formazione del complesso MHC II, e notano modificazioni post-traduzionali inclusa la formazione di legami disolfuro e glicosilazione N-linkata, che sono critiche per la sua struttura e funzione.
• I polimorfismi in HLA-DQA1, da soli o in combinazione con HLA-DQB1, sono fortemente associati alla celiachia (da cui l'alias CELIAC1) e ad altri disturbi autoimmuni, sottolineando la sua rilevanza clinica.
• Oltre alle APC professionali, le molecole di MHC di classe II sono espresse costitutivamente sulle cellule epiteliali gastrointestinali, contribuendo alla sorveglianza immunitare locale, una caratteristica distintiva nota nel tratto GI.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Questo anticorpo monoclonale è stato sviluppato contro un peptide sintetico corrispondente a una sequenza interna (aa 155-254) di HLA-DQA1 umano, suggerendo il riconoscimento di un epitopo lineare probabilmente esposto in condizioni denaturanti, a supporto del suo uso in WB.
• Per la WB, considerare l'esecuzione di lisati cellulari totali o frazioni arricchite di membrana da cellule immunitarie umane, di topo o di ratto (es. cellule B Raji, cellule dendritiche) in condizioni riducenti; è prevista una banda vicino a 28 kDa per la catena alfa glicosilata.
• In IHC-P, il recupero dell'antigene può ottimizzare la colorazione; testare su tessuto umano di tonsilla, milza o intestino fissato in formalina e incluso in paraffina, così come su organi linfoidei di topo/ratto, e validare con appropriati controlli negativi.
• Le applicazioni ELISA potrebbero richiedere l'ottimizzazione del tampone di rivestimento e del sistema di rilevamento; considerare l'uso dell'anticorpo in un formato ELISA a sandwich con un anticorpo di rilevamento abbinato se disponibile.
• Data la cross-reattività con topo e ratto, questo anticorpo può essere impiegato in modelli traslazionali di autoimmunità, trapianto o malattie infettive, ma confermare sempre la specificità nel sistema sperimentale desiderato.

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