Anticorpo monoclonale anti-HLA-DR per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P01903

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Catena Alfa HLA-DR

• HLA-DRA (noto anche come HLA-DRA1) è un gene sul cromosoma 6 che codifica per la catena alfa delle molecole MHC di classe II, con un peso molecolare previsto di circa 29 kDa (forma matura di circa 26 kDa dopo il taglio del peptide segnale).
• La catena alfa codificata si assembla con la catena beta HLA-DRB per formare eterodimeri funzionali HLA-DR che presentano peptidi antigenici alle cellule T CD4-positive, dirigendo le funzioni effettrici dei linfociti T helper e l'attivazione dei macrofagi (PubMed:15265931, PubMed:15322540, PubMed:17334368). Riferimenti correlati: PMID:15265931 PMID:15322540 PMID:17334368
• Il caricamento del peptide antigene segue due modalità di processamento distinte: "legare prima, tagliare/trimmare dopo" per i peptidi derivati da patogeni e "tagliare prima, legare dopo" per i peptidi self, con il residuo ancorante N-terminale (tipicamente un amminoacido idrofobico grande) essenziale per il legame con MHCII (PubMed:25413013, PubMed:8145819). Riferimenti correlati: PMID:25413013 PMID:8145819
• Nel microambiente tumorale, HLA-DR presenta antigeni derivati dal tumore catturati tramite fagocitosi o macropinocitosi da APC, facilitando le risposte delle cellule T CD4+ anti-tumorali (PubMed:31495665). Riferimenti correlati: PMID:31495665
• Il complesso HLA-DR cicla attraverso compartimenti endosomiali e lisosomiali, inclusi gli autolisosomi dove presenta peptidi derivati da proteine intracellulari processate dall'autofagia, un meccanismo cruciale per la selezione timica delle cellule T e la tolleranza centrale (PubMed:17182262, PubMed:23783831). Riferimenti correlati: PMID:17182262 PMID:23783831
• HLA-DRA è espresso a livello proteico nelle cellule presentanti l'antigene professionali—macrofagi, cellule dendritiche, linfociti B—e nelle cellule epiteliali timiche, in linea con il suo ruolo nell'immunità adattativa (PubMed:15322540, PubMed:23783831, PubMed:31495665). Riferimenti correlati: PMID:15322540 PMID:23783831 PMID:31495665
• HLA-DRA è una glicoproteina transmembrana caratterizzata da legami disolfuro e potenziale ubiquitinazione (legame isopeptidico), che può influenzare la sua stabilità e traffico durante la formazione della sinapsi immunologica.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Progettazione dell'immunogeno: L'anticorpo è stato generato contro un peptide compreso tra gli amminoacidi 100-200 di HLA-DRA umano, che dovrebbe riconoscere l'ectodominio maturo; la reattività crociata con altre specie non è garantita ma può essere testata se necessario.
• Western blot (WB): Utilizzare condizioni riducenti e includere un marcatore di peso molecolare; la banda rilevata dovrebbe apparire a ~29 kDa. Includere un lisato di controllo positivo da linee cellulari di linfociti B umani (es. Raji) o PBMC.
• Immunofluorescenza (IF/ICC): Permeabilizzare le cellule con Triton X-100 allo 0,1% per consentire l'accesso dell'anticorpo agli epitopi intracellulari; HLA-DR si localizza principalmente sulla superficie cellulare e nei compartimenti endocitici. Utilizzare APC umane o linee cellulari che esprimono HLA-DR come controlli positivi.
• Immunoistochimica su paraffina (IHC-P): Eseguire il recupero dell'antigene indotto dal calore in tampone citrato (pH 6,0) prima dell'incubazione; validare la colorazione su tessuti linfoidi umani (tonsilla, milza) noti per esprimere MHCII.
• ELISA: L'anticorpo può essere utilizzato in un formato ELISA sandwich con un anticorpo di rilevamento abbinato; validare utilizzando proteina HLA-DR ricombinante o piastre rivestite con peptide.

CamelBio: Il Vostro Ponte di Approvvigionamento Tutto-in-Uno

CamelBio offre una piattaforma semplificata tutto-in-uno per l'approvvigionamento di materie prime per IVD, inclusi questo anticorpo monoclonale anti-HLA-DR validato e reagenti complementari come coppie antigene abbinate e anticorpi di rilevamento. Il nostro catalogo focalizzato sull'immunologia supporta lo sviluppo dei vostri saggi diagnostici mirati alle molecole MHC di classe II, e i nostri team tecnici possono assistervi nella personalizzazione dei formati dei reagenti e nella scalabilità dell'approvvigionamento per rispettare le tempistiche del vostro progetto.