Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-HLA-DRA per WB, IHC-P, ELISA - P01903

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di HLA-DRA

• HLA-DRA è la catena alfa del MHC di classe II, nota anche come antigene MHC di classe II DRA, e si associa alla catena beta HLA-DRB per formare il complesso di presentazione dell'antigene.
• In complesso con HLA-DRB, presenta peptidi antigenici sulle cellule APC professionali per il riconoscimento delle cellule T CD4+, guidando le funzioni effettrici dei T-helper inclusa la risposta immunitaria mediata da anticorpi e l'attivazione dei macrofagi. Riferimenti correlati: PMID:15265931 PMID:15322540 PMID:17334368
• Tipicamente presenta antigeni peptidici extracellulari da 10 a 30 amminoacidi derivanti dalla proteolisi di antigeni endocitati nei lisosomi. Riferimenti correlati: PMID:8145819
• Nel microambiente tumorale, presenta peptidi antigenici generati principalmente nelle APC residenti nel tumore, probabilmente tramite fagocitosi di cellule tumorali apoptotiche o macropinocitosi di proteine tumorali secrete. Riferimenti correlati: PMID:31495665
• Presenta peptidi derivati da proteine intracellulari intrappolate negli autolisosomi dopo macroautofagia, un meccanismo rilevante per la selezione delle cellule T nel timo e per la tolleranza immunitaria centrale. Riferimenti correlati: PMID:17182262 PMID:23783831
• La selezione degli epitopi immunodominanti segue due modalità di elaborazione: "lega prima, taglia/ritaglia dopo" per i peptidi derivati da patogeni e "taglia prima, lega dopo" per gli autoantigeni/peptidi self. Riferimenti correlati: PMID:25413013
• Il residuo di ancoraggio alla posizione 1 dell'estremità N del peptide, solitamente un residuo idrofobo grande, è essenziale per l'interazione ad alta affinità con le molecole MHCII. Riferimenti correlati: PMID:8145819
• HLA-DRA si localizza alla membrana cellulare, alla membrana del reticolo endoplasmatico, alle membrane degli endosomi precoci/tardivi, alla membrana lisosomiale e alla membrana degli autolisosomi.
• Espresso nelle APC professionali (macrofagi, cellule dendritiche, cellule B) e nelle cellule epiteliali timiche. Riferimenti correlati: PMID:15322540 PMID:23783831 PMID:31495665
• Glicoproteina con legami disolfuro e un'elica transmembrana; subisce modificazioni post-traduzionali essenziali per la stabilità e la funzione del MHCII.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 100-200 dell'HLA-DRA umano; per la validazione analitica, considerare l'utilizzo della proteina ricombinante a lunghezza intera o lisati cellulari che esprimono complessi nativi di MHC di classe II.
• Per il Western blot (WB), è prevista una banda a circa 29 kDa in condizioni riducenti; ottimizzare la diluizione dell'anticorpo primario e utilizzare reagenti di rilevamento secondari appropriati.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene ed è consigliabile validare il pattern di colorazione in tessuti di controllo positivo come il linfonodo o la milza.
• Nell'ELISA, assicurarsi di un rivestimento ottimale con l'antigene bersaglio e validare utilizzando campioni di controllo positivo e negativo noti.
• Dato che questo anticorpo è prodotto contro una sequenza umana, confermare la reattività crociata quando si utilizzano campioni non umani.

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