Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-HLA-DRA per WB, IHC-P, ELISA - P01903

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di HLA-DRA

• HLA-DRA codifica per la catena alfa dell'antigene di istocompatibilità di classe II HLA, una glicoproteina eterodimerica di superficie cellulare che si associa a HLA-DRB per formare il complesso MHC di classe II.
• La molecola MHCII presenta peptidi antigenici extracellulari processati (10–30 amminoacidi) alle cellule T helper CD4+, innescando risposte immunitarie adattative come la produzione di anticorpi e l'attivazione dei macrofagi. Riferimenti correlati: PMID:15265931, PMID:15322540, PMID:17334368, PMID:8145819
• HLA-DRA è espresso su cellule presentanti l'antigene professionali, inclusi macrofagi, cellule dendritiche, linfociti B e cellule epiteliali timiche, in linea con il suo ruolo nella sorveglianza immunitaria e nella selezione dei linfociti T. Riferimenti correlati: PMID:15322540, PMID:23783831, PMID:31495665
• A livello subcellulare, la proteina si localizza sulla membrana plasmatica e in compartimenti vescicolari intracellulari—reticolo endoplasmatico, endosomi, lisosomi e autolisosomi—riflettendo il suo traffico per il caricamento dell'antigene.
• Le modifiche post-traduzionali chiave includono N-glicosilazione, formazione di ponti disolfuro e potenziale ubiquitinazione, che contribuiscono alla stabilità e al ricambio di MHCII.
• La struttura della proteina include un peptide segnale, domini extracellulari, un'elica transmembrana e una coda citoplasmatica; le strutture cristallografiche dell'eterodimero DR hanno fatto progredire la comprensione del legame del peptide.
• Nel microambiente tumorale, HLA-DRA presenta peptidi derivati dal tumore ai linfociti T, svolgendo un ruolo nell'immunità anti-tumorale. Riferimenti correlati: PMID:31495665
• Il processamento autolisosomiale di peptidi intracellulari da parte di MHCII è cruciale per la selezione timica dei linfociti T e la tolleranza immunitaria centrale. Riferimenti correlati: PMID:17182262, PMID:23783831
• La selezione dell'epitopo immunodominante segue due modalità: 'legare prima, tagliare/rifinire dopo' per peptidi di origine patogena e 'tagliare prima, legare dopo' per autoantigeni. Riferimenti correlati: PMID:25413013

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende il dominio extracellulare (aa 26–216) di HLA-DRA umano, consentendo la potenziale rilevazione sia delle conformazioni proteiche denaturate che native in applicazioni come WB, IHC-P ed ELISA.
• Nell'analisi Western blot, ci si aspetta una banda intorno a 29 kDa; tuttavia, una glicosilazione variabile può causare uno spostamento del peso molecolare apparente. Convalidare il pattern delle bande in un lisato di linea cellulare o tessuto rilevante.
• Per l'immunoistochimica su sezioni incluse in paraffina, è consigliata l'ottimizzazione del recupero dell'antigene. Tessuti di controllo positivi includono linfonodo umano, milza o tonsille.
• È stata riportata reattività incrociata con il ratto; per altre specie, verificare l'omologia di sequenza della regione immunogena prima dell'uso.
• In ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per la cattura o il rilevamento di HLA-DRA in surnatanti di coltura cellulare o lisati; considerare l'abbinamento con appropriati anticorpi secondari e ottimizzare le condizioni di rivestimento.

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