Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-HLA-DRB1 per WB, IHC-P, ELISA - P01911

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'HLA-DRB1

• L'HLA-DRB1 codifica la catena beta della molecola MHC di classe II, che si accoppia con la catena alfa HLA-DRA per presentare peptidi antigenici alle cellule T CD4+, orchestrando le risposte immunitarie adattative.
• La tasca di legame del peptide ospita tipicamente antigeni extracellulari di 10-30 amminoacidi derivati da proteine endocitate, con un residuo di ancoraggio chiave nella posizione 1 (PubMed:8145819). Riferimenti correlati: PMID:8145819
• Oltre alla presentazione di antigeni esogeni, l'HLA-DRB1 può presentare peptidi intracellulari tramite autofagia, importante per la selezione delle cellule T timiche e la tolleranza centrale (PubMed:17182262, PubMed:23783831). Riferimenti correlati: PMID:17182262 PMID:23783831
• A livello subcellulare, la proteina si localizza alla membrana cellulare, al reticolo endoplasmatico e ai compartimenti endolisosomiali (endosomi tardivi, lisosomi, autolisosomi), riflettendo i suoi ruoli nel traffico e nella lavorazione degli antigeni.
• L'espressione tissutale è predominante nelle cellule professionali di presentazione dell'antigene: monociti/macrofagi, cellule dendritiche e cellule B, nonché nelle cellule epiteliali timiche (PubMed:19830726, PubMed:23783831, PubMed:31495665). Riferimenti correlati: PMID:19830726 PMID:23783831 PMID:31495665
• L'HLA-DRB1 è altamente polimorfico, con centinaia di varianti alleliche; alleli specifici sono associati alla presentazione di epitopi distinti derivati da patogeni, influenzando la suscettibilità alle malattie infettive e all'autoimmunità (PubMed:22327072, PubMed:29884618, PubMed:27591323). Riferimenti correlati: PMID:22327072 PMID:29884618 PMID:27591323
• La proteina subisce modifiche post-traduzionali tra cui glicosilazione e formazione di legami disolfuro, e funge anche da recettore per l'ingresso del virus Epstein-Barr nei linfociti.
• Le parole chiave biologiche principali includono immunità adattativa, MHC II, glicoproteina e proteina transmembrana, evidenziando il suo ruolo centrale nel riconoscimento e nella segnalazione immunitaria.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre i residui 100–200 dell'HLA-DRB1 umano (P01911). Questa regione può includere porzioni del dominio beta-2; considerare la sua conservazione tra gli alleli quando si interpreta la reattività incrociata negli esperimenti.
• Per il Western blotting (WB), il peso molecolare previsto è di circa 30 kDa; convalidare con appropriati controlli positivi (ad es. linee cellulari linfoblastoidi o cellule mononucleate del sangue periferico isolate) in condizioni riducenti.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), i metodi di recupero dell'antigene (ad es. recupero dell'epitopo indotto dal calore in tampone citrato) potrebbero essere necessari per esporre l'epitopo nei tessuti inclusi in paraffina e fissati in formalina.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; ottimizzare le condizioni di rivestimento e utilizzare la proteina HLA-DRB1 ricombinante o complessi peptide-HLA come standard.
• Dato il polimorfismo dell'HLA-DRB1, confermare la reattività specifica per allele se necessario utilizzando linee cellulari ingegnerizzate che esprimono alleli definiti o tramite sequenziamento.
• Come per qualsiasi anticorpo monoclonale, eseguire diluizioni seriali e includere controlli di isotipo per garantire la specificità e minimizzare il background.

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