Anticorpo Policlonale Anti-HLA-DRB3 per WB ed ELISA - P79483

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di HLA-DRB3

• HLA-DRB3 codifica per la catena beta della molecola MHC di classe II, che si associa alla catena alfa HLA-DRA per formare un eterodimero sulla superficie delle cellule presentanti l'antigene professionali (APC).
• Il complesso MHCII presenta peptidi antigenici (tipicamente 10–30 amminoacidi da proteine endocitate) alle cellule T CD4+, guidando le funzioni effettrici dei linfociti T helper come l'immunità mediata da anticorpi e l'attivazione dei macrofagi (PubMed:16148104, PubMed:19531622, PubMed:19830726). Riferimenti correlati: PMID:16148104, PMID:19531622, PMID:19830726
• Il gene presenta diversi alleli con repertori di legame peptidico distinti. L'ALLELE DRB3*01:01 presenta epitopi della tossina tetanica e dell'HHV-6B (PubMed:19830726, PubMed:2463305, PubMed:2788702, PubMed:31020640). Riferimenti correlati: PMID:19830726, PMID:2463305, PMID:2788702, PMID:31020640
• L'ALLELE DRB3*02:02 presenta epitopi della tossina tetanica, EBV, HHV-6B, virus della dengue, IAV e antigeni tumorali WT1, NY-ESO-1 e TP53 (PubMed:19830726, PubMed:2788702, PubMed:23569328, PubMed:31308093, PubMed:31020640, PubMed:31333679, PubMed:22929521, PubMed:19531622, PubMed:20368442, PubMed:30282837). Riferimenti correlati: PMID:19830726, PMID:2788702, PMID:23569328, PMID:31308093, PMID:31020640, PMID:31333679, PMID:22929521, PMID:19531622, PMID:20368442, PMID:30282837
• L'ALLELE DRB3*03:01 presenta peptidi da M. tuberculosis e HCV (PubMed:32341563, PubMed:2788702, PubMed:16148104). Riferimenti correlati: PMID:32341563, PMID:2788702, PMID:16148104
• A livello subcellulare, si localizza sulla membrana cellulare così come sulle membrane del reticolo endoplasmatico, endosomi tardivi, lisosomi e autolisosomi.
• Esso è espresso nelle APC professionali: monociti/macrofagi, cellule dendritiche e linfociti B.
• Le modifiche post‑traduzionali includono glicosilazione, formazione di legami disolfuro e ubiquitinazione. Parole chiave: Immunità adattativa, MHC II, Glicoproteina, Segnale, Transmembrana.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 30–227, suggerendo che l'anticorpo possa riconoscere più epitopi del dominio extracellulare. Validare in linee cellulari APC rilevanti (es. cellule B Raji, cellule dendritiche derivate da monociti) per WB ed ELISA.
• Per il WB, utilizzare SDS-PAGE riducente e caricare 20–30 µg di lisato; il peso molecolare previsto è ~30 kDa in condizioni riducenti. Ottimizzare il bloccaggio con BSA al 5%.
• Per l'ELISA, rivestire con proteina ricombinante o lisato cellulare a 1–2 µg/mL; verificare la reattività incrociata contro le catene beta correlate di HLA-DR.
• Evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento e utilizzare cocktail freschi di inibitori delle proteasi per mantenere l'integrità dell'antigene.
• Abbinare a un anticorpo secondario appropriato e considerare di titolare l'anticorpo primario (es. 1:500–1:2000 per WB) per minimizzare il fondo.

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