Anticorpo monoclonale di coniglio anti-HMGB1 (convalidato KO) per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P09429

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Proteina del Gruppo B1 ad Alta Mobilità

• HMGB1 (proteina del gruppo B1 ad alta mobilità, nota anche come HMG-1) è una proteina multifunzionale sensibile allo stato redox che agisce come uno chaperone del DNA nel nucleo, dove partecipa a replicazione, trascrizione, rimodellamento della cromatina, ricombinazione V(D)J, riparazione del DNA e stabilità del genoma. (PubMed:33147444) Riferimenti correlati: PMID:33147444
• Funziona come modello molecolare associato al pericolo (DAMP) quando rilasciata extracellulare, mediando risposte infiammatorie e immunitarie legandosi a recettori come RAGE, TLR2 e TLR4. (PubMed:27362237, PubMed:34743181) Riferimenti correlati: PMID:27362237 PMID:34743181
• L'attività di HMGB1 è dettata dal suo stato redox: la forma completamente ridotta agisce come una chemochina, la forma disolfuro come una citochina e la forma solfonilica promuove la tolleranza immunologica. (PubMed:23446148, PubMed:23519706, PubMed:23994764) Riferimenti correlati: PMID:23446148 PMID:23519706 PMID:23994764
• La localizzazione subcellulare di HMGB1 è dinamica e include il nucleo, il cromosoma, il citoplasma, la membrana cellulare, l'endosoma, il reticolo endoplasmatico e le forme secrete.
• Modifiche post-traduzionali come acetilazione, ADP-ribosilazione, fosforilazione e ossidazione regolano la distribuzione subcellulare e le attività funzionali di HMGB1.
• HMGB1 è espressa ubiquitariamente, con espressione confermata nelle piastrine. (PubMed:11154118) Riferimenti correlati: PMID:11154118
• La proteina svolge un ruolo nelle interazioni ospite-virus, essendo critica per l'ingresso di SARS-CoV-2 e SARS-CoV, e facilitando la replicazione del virus dell'influenza A, di EBV e del virus della dengue. (PubMed:33147444, PubMed:35239449) Riferimenti correlati: PMID:33147444 PMID:35239449

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 100–200 di HMGB1 umano. Considerare l'uso di proteina ricombinante a lunghezza intera o il mappaggio dell'epitopo per confermare la specificità di rilevamento.
• Per il Western blotting, HMGB1 ha un peso molecolare previsto di ~25 kDa; possono apparire bande multiple a causa di modifiche post-traduzionali o stati redox.
• In IHC-P, ottimizzare i metodi di recupero dell'antigene e convalidare utilizzando tessuti con pattern di espressione di HMGB1 noti (es. tonsilla, fegato). Includere controlli positivi e negativi appropriati.
• In IF/ICC, notare che HMGB1 può spostarsi tra nucleo e citoplasma a seconda dello stress cellulare. Trattare le cellule con stimoli come LPS o TNF-α per valutare la traslocazione.
• Per l'ELISA, assicurarsi che la coppia di anticorpi sia convalidata per il formato di saggio scelto; la regione dell'epitopo (100–200) dovrebbe essere accessibile nella preparazione dell'antigene target.

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