Anticorpo policlonale anti-HMGCL per WB, IHC-P, ELISA - P35914

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di HMGCL

• HMGCL (idazil (S)-3-idrossi-3-metilglutaril-CoA in acetil-CoA e acetoacetato.
• Si localizza principalmente nella matrice mitocondriale ed è presente anche nei perossisomi, in linea con il suo ruolo nel metabolismo lipidico.
• L'enzima presenta la massima espressione nel fegato, con espressione aggiuntiva nel pancreas, rene, intestino, testicolo, fibroblasti e linfoblasti; espressione molto bassa nel cervello e nel muscolo scheletrico.
• Un isoforma di splicing alternativo (isoforma 2) mostra la più alta espressione relativa di mRNA nel cuore (30%), muscolo scheletrico (22%) e cervello (14%).
• HMGCL è una liasi legante metalli; la sua attività dipende da cazioni bivalenti e appartiene alla famiglia delle liasi HMG-CoA.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e formazione di ponti disolfuro, che possono regolare la sua funzione o stabilità.
• Le mutazioni in HMGCL sono collegate alla carenza di idrossi-3-metilglutaril-CoA liasi, un raro disturbo metabolico autosomico recessivo.
• I corpi chetonici prodotti tramite questa via servono come fonte di energia alternativa al glucosio, specialmente durante il digiuno, e agiscono come precursori lipidici e regolatori metabolici.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre l'HMGCL umano a lunghezza intera (aa 1-325), quindi ci si aspetta che l'anticorpo riconosca la proteina nativa in condizioni denaturanti e native.
• Per il Western blot, è prevista una banda a circa 34 kDa; considerare l'uso di condizioni riducenti e validare con un controllo positivo come il lisato epatico.
• In IHC-P, prevedere una colorazione mitocondriale nei tessuti con alta espressione di HMGCL (es. fegato); potrebbe essere necessario un metodo appropriato di recupero dell'antigene.
• L'anticorpo cross-reagisce con topo e ratto; quando si utilizzano queste specie, validare la specificità nel tessuto o sistema cellulare pertinente.
• Per ELISA, considerare la rivestimento con l'immunogeno ricombinante o un peptide e ottimizzare empiricamente le condizioni del saggio.

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