Anticorpo monoclonale di coniglio anti-HMGCS2 per WB, IF, IHC-P, ELISA - P54868

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di HMGCS2

• L'HMGCS2 catalizza la prima fase irreversibile della chetogenesi, condensando acetil-CoA e acetoacetil-CoA per formare 3-idrossi-3-metilglutaril-CoA (HMG-CoA). Questo HMG-CoA può anche essere convertito dalla HMG-CoA reduttasi in mevalonato, collegando le vie chetogeniche e colesterogeniche.
• L'enzima si localizza nella matrice mitocondriale, coerentemente con il suo ruolo nella produzione epatica di corpi chetonici.
• L'HMGCS2 è espresso prevalentemente nel fegato, con analisi quantitative che mostrano livelli oltre 200 volte superiori rispetto ad altri tessuti. Una bassa espressione è rilevata nel colon, rene, testicoli e pancreas, e molto bassa nel cuore e nel muscolo scheletrico; è assente nel cervello (PubMed:16940161, PubMed:21952825, PubMed:7893153). In particolare, i dati sui trascritti indicano l'espressione più elevata nel cuore e nel muscolo scheletrico, suggerendo una regolazione post-trascrizionale o differenze tra isoforme. Riferimenti correlati: PMID:16940161 PMID:21952825 PMID:7893153
• Lo splicing alternativo produce molteplici isoforme che, insieme all'acetilazione e alla fosforilazione post-traduzionale, contribuiscono alle bande proteiche osservate a 50, 52 e 56 kDa.
• Le mutazioni in HMGCS2 sono legate a disturbi metabolici (variante di malattia), sottolineando il suo significato clinico.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è stato progettato utilizzando un peptide della regione C-terminale (aa 400-500) dell'HMGCS2 umano, una strategia che può migliorare la specificità. Quando si adatta questo approccio, allineare le sequenze tra le specie se si desidera la reattività crociata.
• Nel Western blotting, osservare le bande multiple tra 50 e 56 kDa dovute a isoforme e modifiche; includere marcatori di peso molecolare e controlli positivi appropriati (ad esempio, lisato epatico).
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene; prevedere una colorazione mitocondriale. L'immunofluorescenza (IF/ICC, IF-P) dovrebbe rivelare un pattern mitocondriale punteggiato.
• L'anticorpo è stato testato su campioni umani, di topo e di ratto, rendendolo adatto a studi comparativi in modelli roditori di chetogenesi o metabolismo epatico.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere l'ottimizzazione delle condizioni di rivestimento e dei titoli anticorpali per l'analita specifico.

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