Anticorpo monoclonale coniglio anti-HN1 per WB, ELISA - Q9UK76

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di HN1 (JPT1)

• HN1 (JPT1, noto anche come omologo 1 associato ai microtubuli di Jupiter, ARM2, o proteina 1 espressa ematologica e neurologica) è una proteina espressa ubiquitariamente con un peso molecolare previsto di ~16 kDa.
• Modula negativamente la segnalazione GSK3B mediata da AKT, influenzando le vie a valle. Riferimenti correlati: PMID:21323578 PMID:22155408
• HN1 promuove la fosforilazione di CTNNB1 (beta-catenina) a Ser-33 e il suo successivo degrado sopprimendo la fosforilazione inibitoria di GSK3B, indebolendo così il complesso APC:CTNNB1:GSK3B e le interazioni CDH1/E-caderina nelle giunzioni aderenti. Riferimenti correlati: PMID:25169422
• La proteina contribuisce alla regolazione della progressione del ciclo cellulare e dell'adesione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:25169422 PMID:25450365
• HN1 esercita un effetto inibitorio sulla via di segnalazione del recettore degli androgeni (AR) inducendo il degrado proteasomiale del recettore. Riferimenti correlati: PMID:22155408
• Si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma, coerente con i suoi ruoli negli eventi di segnalazione trascrizionale e citoplasmatica.
• L'espressione tissutale è ampia, con livelli notevoli nel testicolo, muscolo scheletrico, timo, prostata, colon, cellule del sangue periferico, cervello e placenta.
• La proteina subisce acetilazione e fosforilazione; lo splicing alternativo produce multiple isoforme.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli aminoacidi 50-154 di HN1 umano, una regione probabilmente coinvolta nelle interazioni proteina-proteina; questa progettazione potrebbe favorire il rilevamento delle conformazioni native.
• Per il Western blot, considerare il test di lisati cellulari totali da linee cellulari umane come LNCaP o HeLa, dove HN1 è espresso endogenamente; ottimizzare empiricamente la diluizione dell'anticorpo e le condizioni di rilevamento.
• Nell'ELISA, l'immunogeno ricombinante può essere utilizzato come controllo positivo; assicurarsi di eseguire appropriati passaggi di rivestimento della piastra e di blocco.
• Validare la specificità tramite knockdown con siRNA o linee cellulari knockout se disponibili, per confermare l'identità della banda.

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