Anticorpo policlonale Anti-HNF4A per WB e ELISA - P41235

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del fattore nucleare epatico 4-alfa

• HNF4A, noto anche come sottofamiglia dei recettori nucleari 2 gruppo A membro 1 (NR2A1) e fattore di trascrizione 14 (TCF14), è un membro della famiglia dei recettori nucleari che funziona come fattore di trascrizione attivato da ligando.
• Nel fegato, HNF4A controlla l'espressione dei geni epatici durante la differenziazione dalle cellule progenitorie endodermiche a quelle epatiche, facilitando il reclutamento della RNA polimerasi II sui promotori bersaglio. Riferimenti correlati: PMID:30597922
• Reprime il complesso trascrizionale CLOCK-BMAL1 ed è essenziale per il mantenimento del ritmo circadiano e la regolazione del periodo nelle cellule del fegato e del colon. Riferimenti correlati: PMID:30530698
• HNF4A si localizza esclusivamente nel nucleo, dove lega il DNA in specifici elementi di risposta.
• Le modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione e coniugazione simile all'ubiquitinazione, modulano la sua attività trascrizionale e la stabilità proteica.
• Le mutazioni in HNF4A sono associate al diabete ad esordio giovanile a maturità tipo 1 (MODY1) e ad altri disturbi metabolici, evidenziando il suo ruolo nell'omeostasi del glucosio.
• L'uso di promotori alternativi e lo splicing generano più isoforme (es. HNF4a7, HNF4a8, HNF4a9), che possono avere funzioni tessuto-specifiche.
• La proteina contiene domini a dito di zinco conservati per il legame al DNA e un dominio di legame per il ligando caratteristico dei recettori nucleari.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente a una sequenza compresa tra gli amminoacidi 226–325 di HNF4A umana. Se si bersagliano varianti di splicing specifiche, si consiglia di verificare la reattività delle isoforme.
• Per Western blotting, il peso proteico previsto è di 53 kDa. L'uso di estratti nucleari da tessuti/cellule di fegato o colon umano può migliorare il segnale.
• Confermare la specificità tramite esperimenti di knockdown o overespressione, e includere controlli positivi e negativi appropriati.
• In ELISA, il peptide immunogeno può servire come controllo positivo; eseguire test su proteina ricombinante full-length per convalidare il legame.
• Gli anticorpi policlonali possono presentare variazioni da lotto a lotto; ristandardizzare il protocollo quando si utilizza un nuovo lotto.

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