Anticorpo policlonale Anti-hnRNP A1 per WB, IF/ICC, ELISA - P09651

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di hnRNP A1

• L'eterogenea ribonucleoproteina nucleare A1 (hnRNP A1), nota anche come proteina destabilizzante l'elica o proteina legante l'RNA a singolo filamento, è una proteina legante l'RNA codificata dal gene HNRNPA1 (ID gene: 3178).
• È coinvolta nell'impacchettamento del pre-mRNA in particelle hnRNP, nel trasporto dell'mRNA poli(A) dal nucleo al citoplasma e nella modulazione della selezione dei siti di splicing. Riferimenti correlati: PMID:17371836
• Svolge un ruolo nello splicing della piruvato chinasi PKM reprimendo le sequenze adiacenti all'esone 9 di PKM, inibendo l'inclusione dell'esone 9, determinando l'inclusione dell'esone 10 e la produzione dell'isoforma PKM M2. Riferimenti correlati: PMID:20010808
• Si lega all'IRES e inibisce la traduzione del fattore di attivazione della proteasi apoptotica APAF1. Riferimenti correlati: PMID:31498791
• Può legarsi ad hairpin di miRNA specifici. Riferimenti correlati: PMID:28431233
• Si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma, partecipando alla shuttling nucleocitoplasmatico dell'mRNA.
• Subisce acetilazione, metilazione, fosforilazione e coniugazione con ubiquitina; le varianti associate a malattie sono correlate alla sclerosi laterale amiotrofica (ALS19, ALS20) e alla neurodegenerazione.
• Può svolgere un ruolo nella replicazione dell'RNA dell'HCV; la scissione da parte della proteasi 3C dell'Enterovirus 71 porta a un aumento della traduzione di APAF1 e all'apoptosi.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1‑140) di hnRNP A1 umano; l'anticorpo può riconoscere la forma full-length e i frammenti N-terminali. La validazione tramite KO conferma la specificità nel western blotting.
• Per il western blotting, utilizzare lisati cellulari o tissutali interi di origine umana, di topo o di ratto. Includere controlli appropriati e validare la rilevazione della banda di ~39 kDa.
• Per l'immunofluorescenza/ICC, aspettarsi una colorazione nucleare e citoplasmatica. Ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione per la linea cellulare utilizzata.
• Per l'ELISA, testare contro la proteina hnRNP A1 ricombinante o lisati cellulari; confermare la linearità e il limite di rilevazione nel sistema sperimentale.
• Valutare se necessario la reattività crociata con altre specie e validarla tramite omologia di sequenza.

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