Anticorpo monoclonale di coniglio anti-hnRNP E2/PCBP2 per WB, IP, ELISA - Q15366

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di hnRNP E2/PCBP2

• La proteina legante il poli(rC) 2 (PCBP2), anche nota come hnRNP E2 o alfa-CP2, è un membro della famiglia hnRNP con molteplici isoforme generate attraverso splicing alternativo. È espressa ubiquitariamente nei tessuti umani.
• Funziona come proteina legante acidi nucleici a singolo filamento con alta affinità per tratti oligo dC e poli(rC); lega anche poli(rU).
  Riferimenti correlati:
  PMID:12414943
  PMID:7607214
• Agisce come regolatore negativo della segnalazione antivirale innata: collega la proteina di segnalazione antivirale mitocondriale (MAVS) e la ligasi E3 ubiquitina ITCH, innescando l'ubiquitinazione e la degradazione di MAVS, attenuando così le risposte mediate da MAVS.
  Riferimenti correlati:
  PMID:19881509
• Inoltre, inibisce il pathway cGAS-STING interagendo direttamente con CGAS e impedendone la separazione di fase in goccioline liquide attive.
  Riferimenti correlati:
  PMID:35322803
• Coopera con il suo paralogo PCBP1 per supportare l'eritropoiesi, probabilmente attraverso la regolazione dello splicing dell'mRNA (per somiglianza).
• Durante l'infezione da poliovirus, PCBP2 lega il sito di ingresso interno del ribosoma (IRES) virale per stimolare la traduzione mediata da IRES e collabora con la proteina virale 3CD per avviare la replicazione dell'RNA virale.
  Riferimenti correlati:
  PMID:12414943
  PMID:24371074
• La localizzazione subcellulare è sia nucleare che citoplasmatica, coerente con i suoi ruoli nel metabolismo dell'RNA e nella regolazione della segnalazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto di PCBP2 è di circa 38.6 kDa (UniProt), ma l'anticorpo tipicamente rileva una banda intorno a 39 kDa. Si consiglia di utilizzare lisati cellulari totali da linee cellulari umane (es. HeLa, HEK293), di topo o di ratto e di validare con controlli appropriati.
• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 220–350, una regione probabilmente conservata tra le specie; l'anticorpo è riportato reagire in modo crociato con campioni umani, di topo e di ratto. Eseguire la validazione necessaria nel proprio sistema sperimentale.
• Per l'immunoprecipitazione, la regione bersaglio dell'anticorpo potrebbe essere accessibile nelle conformazioni native; ottimizzare le condizioni di lisi e lavaggio per preservare le interazioni proteiche.
• Quando si utilizza l'ELISA, considerare l'accoppiamento con un anticorpo di rilevamento diretto contro un epitopo distinto per ottenere una quantificazione sensibile; verificare la specificità contro la proteina ricombinante.
• A causa dello splicing alternativo e di potenziali modifiche post-traduzionali, possono apparire bande multiple; confermare mediante knockdown o spettrometria di massa se necessario.

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