Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-hnRNP U per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - Q00839

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di hnRNP U

• hnRNP U è una proteina multifunzionale legante DNA e RNA che organizza l'architettura della cromatina legandosi a RNA associati alla cromatina (caRNA) ed elementi della regione di attacco allo scaffold/matrice (S/MAR), essenziale per mantenere la stabilità genomica. Riferimenti correlati: PMID:1324173, PMID:8174554, PMID:10671544, PMID:11003645, PMID:11909954, PMID:28622508
• Agisce come regolatore trascrizionale promuovendo l'assemblaggio del complesso pre-iniziazione attraverso l'interazione con TFIIH, mentre inibisce anche l'elongazione bloccando la fosforilazione del CTD dell'RNA Pol II. Riferimenti correlati: PMID:10490622, PMID:15711563
• hnRNP U è cruciale per l'inattivazione del cromosoma X legando direttamente e ancorando l'RNA lungo non codificante Xist al cromosoma X inattivo.
• La proteina modula lo splicing alternativo regolando la biogenesi dello snRNP U2 e legandosi a regioni ricche in G/U nei pre-mRNA, incluso SMN1/2. Riferimenti correlati: PMID:22325991
• Regola la stabilità dell'mRNA, aumentando l'espressione di bersagli come MYC e TNFA attraverso interazioni con il complesso mediato da CRD e le regioni 3'-UTR. Riferimenti correlati: PMID:17174306, PMID:17289661, PMID:19029303
• Durante la mitosi, la fosforilazione a Ser-59 da parte di PLK1 è necessaria per il corretto allineamento e la segregazione cromosomica, e contribuisce all'organizzazione del fuso. Riferimenti correlati: PMID:21242313, PMID:25986610
• hnRNP U è prevalentemente nucleare, ma si localizza anche a strutture citoscheletriche inclusi i centrosomi, i cinetocori, i poli del fuso e il corpo mediano durante la divisione cellulare.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Data la progettazione dell'immunogeno (frammento C-terminale, a.a. 608-825), ci si aspetta che questo anticorpo policlonale rilevi l'hnRNP U a lunghezza intera così come potenziali varianti di splicing contenenti questa regione.
• Per il Western blot, è prevista una banda a ~91 kDa; utilizzare estratti cellulari totali o nucleari da tessuti/cellule umane, di topo o di ratto come controlli positivi.
• Quando si esegue immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione per preservare l'architettura nucleare, poiché hnRNP U mostra localizzazione sia nucleare che nell'apparato mitotico.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene; validare con campioni tissutali noti positivi e negativi.
• Per l'immunoprecipitazione (IP), considerare l'uso di lisati nucleari e validare gli acidi nucleici o i partner proteici co-precipitati se si studiano interazioni cromatina/RNA.
• È stata riportata reattività crociata con le specie topo e ratto, ma verificare sempre la reattività nel proprio sistema campione specifico.

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