Anticorpo policlonale coniglio anti-HNRNPD per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q14103

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di HNRNPD

• HNRNPD, noto anche come AUF1, è una ribonucleoproteina nucleare eterogenea che lega specificamente gli elementi ricchi di AU (ARE) presenti nella regione 3'-UTR di molti mRNA labili, come i protooncogeni e le citochine, per regolarne la stabilità e il ricambio.
• Agisce non solo nel metabolismo dell'RNA, ma anche come fattore di trascrizione legandosi al DNA a doppio e singolo filamento, influenzando probabilmente il mantenimento dei telomeri mediante l'interazione con le ripetizioni TTAGGG.
• La proteina contiene due motivi di riconoscimento dell'RNA (RRM) che riconoscono il motivo 5'-UUAG-3' nell'RNA; può legare sia l'RNA che il DNA telomerico a singolo filamento, con RRM1 che inibisce la formazione del quadruplex del DNA.
• HNRNPD è coinvolto nei processi di deadenilazione/degradazione citoplasmatici, inclusa la degradazione dell'mRNA FOS mediata dal principale determinante di instabilità della regione codificante, e può facilitare il ricambio dell'mRNA accoppiato alla traduzione.
• Svolge un ruolo nell'orologio circadiano legando direttamente la 3'UTR dell'mRNA di CRY1 e aumentandone la traduzione ritmica, e può anche modulare la traduzione di PER2.
• Tramite splicing alternativo si generano diverse isoforme, che danno origine a varianti come p37, p40, p42 e p45, che presentano attività diverse nella degradazione dell'mRNA.
• La proteina si sposta tra nucleo e citoplasma, e la sua localizzazione subcellulare influenza il suo ruolo funzionale nella processazione e degradazione dell'RNA.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, metilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che possono modulare l'affinità di legame e la distribuzione subcellulare.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno utilizzato è una proteina ricombinante corrispondente agli amminoacidi 1-306 dell'HNRNPD umano (lunghezza completa), quindi ci si aspetta che l'anticorpo riconosca sia le porzioni nucleari che citoplasmatiche, nonché le principali isoforme.
• Per il western blot (WB) viene rilevata una banda prevista di circa 38 kDa in lisati di uomo, topo e ratto; tuttavia, i pattern specifici delle isoforme possono variare, quindi si consiglia la validazione nel vostro sistema sperimentale specifico.
• Questo anticorpo policlonale può essere utilizzato in immunoistochimica (IHC-P), immunofluorescenza (IF/ICC) e ELISA; per la IF si consiglia di ottimizzare le condizioni di fissazione/permeabilizzazione per preservare l'accessibilità all'epitopo.
• Per lo studio dell'espressione correlata al ritmo circadiano, si raccomanda il campionamento in serie temporale e l'uso di controlli positivi appropriati (ad esempio linee cellulari sincronizzate) per catturare i cambiamenti ritmici.

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