Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-Homer1 per WB, ELISA - Q86YM7

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Homer1

• Homer1 è una proteina di supporto della densità postsinaptica appartenente alla famiglia Homer, codificata dal gene HOMER1 (nome alternativo SYN47). La proteina esiste in più isoforme prodotte da splicing alternativo, tra cui le isoforme 1, 2 e 3, con ruoli funzionali distinti.
• Lega e collega i recettori glutamatergici metabotropi del gruppo I (GRM1, GRM5) ai recettori dell'inositolo 1,4,5-trifosfato associati al reticolo endoplasmatico (ITPR1), accoppiando così l'attivazione del recettore di superficie al rilascio di calcio intracellulare.
• Homer1 collega inoltre GRM1 alla PI3 chinasi tramite interazione con AGAP2, e forma complessi di ordine superiore con SHANK1, elemento critico per l'integrità strutturale e funzionale delle spine dendritiche.
• L'isoforma 1 regola il traffico e l'espressione superficiale di GRM5, mentre l'isoforma 3 agisce come dominante negativo naturale, competendo con l'isoforma 1 per modulare la funzione glutamatergica metabotropa sinaptica durante la plasticità neuronale a lungo termine e lo sviluppo.
• Homer1 si localizza nel citoplasma, nella densità postsinaptica, nella sinapsi e nelle spine dendritiche, in coerenza con il suo ruolo nell'organizzazione sinaptica.
• Regola negativamente l'attivazione delle cellule T inibendo la via calcineurina-NFAT, competendo con la calcineurina per il legame con la proteina NFAT e prevenendo l'attivazione di NFAT. Riferimenti correlati: PMID:18218901
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, come indicato dall'identificazione proteomica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 101–220 di Homer1 umano, una regione centrale che può includere domini funzionali critici per la specificità dell'anticorpo. Quando si progettano anticorpi simili, considerare le regioni conservate tra le isoforme per ottenere una reattività ampia, oppure sequenze specifiche di isoforma se è richiesta una rilevazione selettiva per isoforma.
• Per Western blot, la banda attesa è intorno a 40 kDa; utilizzare lisati di tessuti/cellule freschi o adeguatamente congelati, e considerare di includere inibitori di fosfatasi poiché Homer1 è una fosfoproteina.
• Le applicazioni ELISA possono essere utilizzate per quantificare Homer1 nei campioni; assicurare condizioni di rivestimento adeguate e validare la linearità con standard di proteine ricombinanti.
• Data la localizzazione sinaptica di Homer1, la frazionamento subcellulare o l'arricchimento delle proteine della densità postsinaptica può migliorare la sensibilità di rilevazione nei campioni neuronali.

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