Anticorpo Policlonale Anti-HR per WB e ELISA - O43593

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Background Biologico: Funzione e Localizzazione di HR

• HR (Hairless) è una istone demetilasi lisina-specifica, nota anche con gli alias AU, MUHH, ALUNC, HYPT4, MUHH1 e HSA277165, codificata dal gene HR.
• Demethyla specificamente la lisina 9 mono- e dimetilata dell'istone H3 (H3K9me1/me2), regolando di conseguenza la struttura della cromatina e la trascrizione genica.
• HR agisce come regolatore della trascrizione fondamentale per la biologia dei capelli, probabilmente attraverso il targeting dei geni del collagene, e modula inoltre l'attività neurale e la progressione del ciclo cellulare.
• La proteina è localizzata nel nucleo, coerentemente con il suo ruolo nella modificazione degli istoni e nella trascrizione.
• L'isoforma 1 e l'isoforma 2 mostrano la massima espressione nell'intestino tenue; l'isoforma 2 è espressa fortemente nella pelle, mentre l'isoforma 1 è espressa debolmente nel cervello e nel colon, con tracce in altri tessuti.
• HR contiene domini a dito di zinco e dipende dal ferro come cofattore per la sua attività demetasica, inserendola nella famiglia delle demetilasi contenenti il dominio JmjC.
• Modificazioni post-traduzionali e splicing alternativo generano diverse isoforme; le mutazioni in HR sono associate al fenotipo della malattia da ipotricosi.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 200–480 della HR umana; questo può generare anticorpi che riconoscono più isoforme di HR se le sequenze dell'epitopo sono conservate.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto di HR è ~127 kDa; utilizzare un gel SDS-PAGE standard con una percentuale di acrilammide adatta (es. 8–10%) e protocolli standard di trasferimento umido o semi-secco per proteine ad alto peso molecolare.
• Per le applicazioni ELISA, ottimizzare la concentrazione di coating dell'antigene e utilizzare un passaggio di bloccaggio con latte scremato o BSA per ridurre il segnale di fondo.
• Dato che HR è espresso nella pelle e nell'intestino tenue, questi tessuti possono essere utilizzati come controlli positivi; convalidare la specificità dell'anticorpo includendo lisati da linee cellulari o tessuti che esprimono HR e considerare l'utilizzo di linee cellulari knockout, se disponibili.

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