Anticorpo Policlonale Anti-HSD3B1 per WB, IF-P, ELISA - P14060

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di HSD3B1

• HSD3B1 è un enzima bifunzionale appartenente alla famiglia 3-beta idrossisteroide deidrogenasi/isomerasi. Catalizza l'ossidazione e l'isomerizzazione dei precursori 3β-idrossi-Δ5-steroidi in 3-oxo-Δ4-steroidi, un passaggio essenziale nella biosintesi di tutti gli ormoni steroidei principali. Questo include la conversione del pregnenolone in progesterone, del 17α-idrossipregnenolone in 17α-idrossiprogesterone, del deidroepiandrosterone (DHEA) in 4-androstenedione e dell'androstenediolo in testosterone. Riferimenti correlati: PMID:1401999 PMID:2139411
• Oltre alla steroidogenesi de novo, HSD3B1 regola la biodisponibilità locale degli androgeni interconvertendo androgeni 5α-ridotti attivi e inattivi. Inattiva efficacemente il diidrotestosterone (DHT) convertendolo in 5α-androstanediolo, un metabolita che non lega il recettore degli androgeni. Riferimenti correlati: PMID:1401999 PMID:2139411
• HSD3B1 è ancorato alle membrane intracellulari tramite un'elica transmembrana a passaggio singolo e si localizza sia nella membrana del reticolo endoplasmatico sia nella membrana mitocondriale.
• L'enzima è espresso prevalentemente nella placenta e nella pelle, e si trova anche a livelli significativi nel tessuto della ghiandola mammaria.
• È classificato in più parole chiave funzionali, tra cui enzima multifunzionale, ossidoreduttasi dipendente da NAD/NADP, isomerasi, metabolismo degli steroidi e metabolismo lipidico, evidenziando il suo ruolo centrale nelle vie steroidogeniche e metaboliche.
• Secondo UniProt, si prevede che HSD3B1 utilizzi NAD+ come donatore di elettroni preferito per la sua attività deidrogenasica e NADPH per l'attività riduttasica.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla proteina HSD3B1 umana a lunghezza intera (amminoacidi 1-290), che può generare una risposta policlonale diretta a più epitopi. Per il Western blot, consigliamo di utilizzare lisati di controllo positivo da tessuto placentare o mammario, o linee cellulari con elevata espressione endogena di HSD3B1 (ad esempio cellule di cancro della mammella o della prostata).
• Il peso molecolare previsto è di circa 42 kDa. Data la sua localizzazione di membrana, assicurare una solubilizzazione sufficiente utilizzando appropriati buffer di lisi contenenti detergenti (ad esempio buffer RIPA) ed evitare di bollire i campioni a temperature eccessivamente elevate per prevenire l'aggregazione.
• Per l'immunofluorescenza (IF-P), includere un passaggio di permeabilizzazione (ad esempio 0,1% Triton X-100) per consentire all'anticorpo di accedere ai compartimenti delle membrane intracellulari. La co-colorazione con marcatori del reticolo endoplasmatico o mitocondriali può convalidare la localizzazione subcellulare attesa.
• L'anticorpo ha confermato reattività crociata con campioni di uomo, topo e ratto. Verificare l'idoneità per altre specie controllando l'omologia di sequenza ed eseguendo un esperimento pilota.
• Come anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti può variare. Consigliamo lo stoccaggio in aliquote e il test a gradiente durante l'ottimizzazione per nuovi saggi, e la convalida delle prestazioni nel vostro sistema di campioni.

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