Anticorpo policlonale di coniglio anti-HSD3B2 per WB, IF/ICC, ELISA - P26439

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di HSD3B2

• L'HSD3B2 (3-beta-HSD II) è codificato dal gene HSD3B2 e appartiene alla famiglia delle 3-beta-idrossisteroide deidrogenasi/isomerasi. È espresso prevalentemente nelle ghiandole surrenali, nei testicoli e nelle ovaie, dove catalizza una fase chiave della biosintesi degli ormoni steroidei.
• L'enzima funge da catalizzatore bifunzionale: ossida gli steroidi Delta(5)-ene-3-beta-idrossi in steroidi Delta(4)-ene-3-cheto e successivamente li isomerizza in steroidi ormonali attivi. Questa attività è essenziale per la produzione di progesterone, glucocorticoidi, mineralcorticoidi e steroidi sessuali.
• L'HSD3B2 è localizzato sia sulla membrana del reticolo endoplasmatico che sulla membrana mitocondriale, con domini transmembrana che lo ancorano a questi organelli. Questa doppia localizzazione supporta il suo ruolo in molteplici fasi della steroidogenesi.
• Significato clinico: Le mutazioni nel gene HSD3B2 sono associate all'iperplasia surrenale congenita (CAH), un disturbo caratterizzato da una compromissione della sintesi di cortisolo e aldosterone, che porta a insufficienza surrenale e gradi variabili di ambiguità sessuale.
• L'immunogeno dell'anticorpo copre gli amminoacidi 1-287 della proteina a lunghezza intera (sequenza di riferimento NP_000189.1), che comprende il dominio catalitico, garantendo il riconoscimento dell'enzima nativo in campioni umani e murini.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Per il Western blotting, è attesa una banda di circa 42 kDa nei lisati di linee cellulari o tessuti umani di surrene, testicolo o ovaio. È possibile utilizzare anche campioni murini con espressione confermata, ma la reattività dell'anticorpo nel topo dovrebbe essere validata nel proprio sistema specifico.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, prevedere pattern di colorazione coerenti con la localizzazione nel reticolo endoplasmatico e nei mitocondri. Utilizzare marcatori specifici per gli organelli e metodi di permeabilizzazione appropriati per aiutare a confermare la distribuzione subcellulare.
• Essendo un anticorpo policlonale, può fornire un segnale più forte grazie al riconoscimento di molteplici epitopi, ma può verificarsi una variabilità da lotto a lotto. Si consiglia di includere un controllo positivo noto (ad esempio, proteina HSD3B2 ricombinante) in ogni esperimento.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento, ma le diluizioni ottimali e le condizioni di accoppiamento devono essere determinate empiricamente.

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