Anticorpo policlonale coniglio Anti-HSF1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q00613

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di HSF1

• HSF1 (fattore di proteina da shock termico 1), noto anche come HSTF1, è un fattore di trascrizione inducibile dallo stress fondamentale nella risposta da shock termico, che promuove l'espressione delle proteine da shock termico (HSP) per proteggere le cellule dallo stress proteotossico. Riferimenti correlati: PMID:11447121 PMID:12659875 PMID:12917326
• In assenza di stress, HSF1 rimane in uno stato monomerico inattivo grazie all'interazione con un complesso multichaperonico contenente HSP90. Dopo lo shock termico, subisce l'omotrimerizzazione, si lega agli elementi da shock termico (HSE) sul DNA e attiva la trascrizione dei geni HSP. Riferimenti correlati: PMID:9727490 PMID:11583998 PMID:16278218 PMID:10359787
• HSF1 riconosce le sequenze pentameriche invertite 5'-NGAAN-3' e si localizza sulla cromatina presso i promotori dei geni da shock termico, formando un complesso con TTC5 e p300 per stimolare la trascrizione. Riferimenti correlati: PMID:1986252 PMID:26727489 PMID:25963659 PMID:18451878
• Oltre all'attivazione trascrizionale, HSF1 modula i processi post-trascrizionali: regola positivamente la lavorazione dell'estremità 3' dell'pre-mRNA, la poliadenilazione e l'esportazione nucleare dell'mRNA di HSP70, in parte tramite la simplechina (SYMPK). Riferimenti correlati: PMID:14707147 PMID:17897941
• HSF1 svolge funzioni indipendenti dalla trascrizione, tra cui la repressione dell'espressione di c‑fos indotta da Ras, la regolazione della progressione mitotica e il controllo negativo della riparazione del DNA per unione non omologa delle estremità (NHEJ). Riferimenti correlati: PMID:9341107 PMID:18794143 PMID:26359349
• Subcellolarmente, HSF1 viene rilevato nel nucleo, nel nucleoplasma, nel citoplasma, nella regione perinucleare, nel polo del fuso, nel centrosoma e nel cinetocoro, il che riflette i suoi molteplici ruoli.
• Modifiche post-traduzionali come la fosforilazione e l'acetilazione regolano finemente l'attività di HSF1, mentre la sua interazione con elementi virali, come l'LTR dell'HIV‑1, sottolinea il suo ruolo nelle interazioni ospite-patogeno.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno (aa 350‑529) bersaglia la porzione C-terminale di HSF1, che è meno conservata del dominio di legame al DNA; confermare la specificità utilizzando lisati di cellule sottoposte a shock termico rispetto a cellule non trattate.
• Per il Western blotting è prevista una banda intorno ai 57 kDa; includere un controllo positivo di shock termico (ad esempio, cellule HeLa trattate a 42°C per 1 ora) e un controllo di caricamento.
• Nell'immunohistochimica (IHC‑P) e nell'immunofluorescenza (IF/ICC), ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene e di fissazione; la localizzazione nucleare di HSF1 aumenta dopo lo stress, quindi si consiglia di confrontare sezioni di tessuto stressate e non colorate.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti può variare; titolare l'anticorpo per ogni applicazione ed eseguire controlli appropriati, soprattutto quando si passa a un nuovo lotto.

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