Anticorpo monoclonale di coniglio anti-HSL/LIPE per WB, IF/ICC, ELISA - Q05469

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di HSL/LIPE

• La lipasi sensibile agli ormoni (HSL/LIPE) è un enzima multifunzionale con ampia specificità di substrato, che catalizza l'idrolisi di triacilgliceroli, diacilgliceroli, monoacilgliceroli, esteri del colesterolo ed esteri del retinolo (PubMed:15716583, PubMed:15955102, PubMed:19800417). Riferimenti correlati: PMID:15716583 PMID:15955102 PMID:19800417
• Nel tessuto adiposo e nel cuore, HSL mobilizza principalmente i trigliceridi immagazzinati trasformandoli in acidi grassi liberi, mentre nei tessuti steroidogenici converte gli esteri del colesterolo in colesterolo libero per la produzione di ormoni steroidei.
• HSL idrolizza preferenzialmente i diacilgliceroli rispetto ai triacilgliceroli e ai monoacilgliceroli e mostra una specificità posizionale per gli esteri degli acidi grassi nello scheletro del glicerolo.
• Oltre alle goccioline lipidiche canoniche, HSL si localizza sulla membrana cellulare, nelle caveole, nel citosol e nelle goccioline lipidiche, riflettendo i suoi ruoli dinamici nella segnalazione e nel metabolismo lipidico.
• Lo splicing alternativo del gene LIPE genera molteplici isoforme, inclusa una variante specifica dei testicoli, che può contribuire alla regolazione tessuto-specifica dell'idrolisi lipidica.
• HSL è classificata come idrolasi della serina e appartiene alla famiglia delle lipasi ‘GDXG’; la sua attività è regolata dalla fosforilazione, in particolare tramite la protein chinasi A (PKA) in risposta ai segnali ormonali.
• La disregolazione di HSL è associata a disturbi metabolici quali obesità, diabete mellito e lipodistrofia, evidenziandone l'importanza nell'omeostasi energetica.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno si trova nella regione C-terminale (amminoacidi 901–1000), il che può facilitare il rilevamento di HSL a lunghezza intera e potenzialmente dei prodotti di clivaggio; considerare l'accessibilità dell'epitopo nella progettazione del test.
• Per il Western blot, per l'isoforma predominante è prevista una banda intorno a 117 kDa; se disponibili, validare la specificità utilizzando controlli di knockdown o knockout.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, HSL può essere visualizzata sulle goccioline lipidiche e nel citoplasma; si raccomanda la co-colorazione con marcatori delle goccioline lipidiche (ad es. BODIPY) e l'ottimizzazione delle condizioni di fissazione/permeabilizzazione.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere l'abbinamento con un anticorpo di cattura; verificare la compatibilità e la sensibilità utilizzando una proteina ricombinante o lisati cellulari.
• È riportata la reattività crociata con il topo, ma gli epitopi conservati tra le specie devono essere verificati se l'anticorpo viene utilizzato oltre che su campioni umani e murini.

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