Anticorpo monoclonale di coniglio anti-HSP27/HSPB1 [Validato per KD] per WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P04792

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di HSP27/HSPB1

• HSPB1 (nota anche come HSP27, HSP28, SRP27) è un membro della famiglia delle piccole proteine da shock termico, con un peso molecolare di circa 23 kDa.
• Funziona come chaperone molecolare, mantenendo le proteine denaturate in uno stato competente per il ripiegamento (PubMed:10383393, PubMed:20178975). Riferimenti correlati: PMID:10383393, PMID:20178975
• Svolge un ruolo nella resistenza allo stress e nell'organizzazione del citoscheletro di actina, contribuendo alla protezione cellulare in condizioni di stress (PubMed:19166925). Riferimenti correlati: PMID:19166925
• Attraverso la sua attività di chaperone, regola processi biologici tra cui la fosforilazione e il trasporto assonale delle proteine dei neurofilamenti (PubMed:23728742). Riferimenti correlati: PMID:23728742
• Si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nel citoscheletro (fuso mitotico) a seconda del contesto cellulare e delle condizioni di stress.
• È altamente espressa in tutti i tessuti, con i livelli più elevati nel cuore e nei tessuti muscolari striati e lisci.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, acetilazione e metilazione, che ne modulano l'attività e la funzione.
• Le mutazioni di HSPB1 sono associate alla malattia di Charcot-Marie-Tooth di tipo 2F (CMT2F) e alla neuropatia motoria ereditaria distale di tipo IIB (HMN2B).

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 1-205 di HSP27/HSPB1 umano, corrispondenti alla proteina a lunghezza intera; questa ampia copertura può rilevare molteplici stati di modifica post-traduzionale.
• Per l'analisi mediante Western blot, si consiglia di prendere in considerazione un gel SDS-PAGE al 10-12% per risolvere la banda attesa di 23 kDa e di validare il rilevamento utilizzando controlli positivi come lisati cellulari di HeLa o MCF-7.
• L'anticorpo è validato per KD, rendendolo un candidato per la conferma di esperimenti di knockdown di HSPB1 mediati da siRNA o CRISPR.
• Nelle applicazioni di immunofluorescenza, è possibile valutare la fissazione con metanolo o paraformaldeide per bilanciare la conservazione dell'epitopo e la morfologia del citoscheletro.
• Per l'immunoistochimica, potrebbe essere necessario ottimizzare le condizioni di recupero antigenico (ad es. tampone citrato a pH 6,0) in base al tipo di tessuto e al metodo di fissazione.

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