Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-HSP40 per WB, FC, ELISA - P25685

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di HSP40/DNAJB1

• Identità proteica: DNAJB1 (conosciuto anche come HSP40, Hdj1, HDJ-1) è una chaperone molecolare umana appartenente alla famiglia DnaJ/HSP40, con due isoforme prodotte da splicing alternativo.
• Attività co-chaperone per HSP70: Si lega alle proteine HSP70 e stimola la loro attività ATPasi, essenziale per il ripiegamento proteico e la prevenzione di aggregazioni.
• Funzione di adattatore chaperone: Insieme a TTC1, agisce come adattatore chaperone che regola il ripiegamento dipendente da HSP70 interagendo con la regione ammino-terminale di HSP70 (PubMed:14503850).
  Riferimenti correlati:
  PMID:14503850
• Regolazione della risposta da shock termico: Regola negativamente l'attività trascrizionale di HSF1 indotta da shock termico durante la fase di attenuazione e recupero, modulando la risposta cellulare allo stress (PubMed:9499401).
  Riferimenti correlati:
  PMID:9499401
• Stabilizzazione del complesso HSC70-HIP: DNAJB1 stimola l'associazione tra la chaperone costitutiva HSC70 e la co-chaperone HIP, migliorando il controllo della qualità proteica.
• Idrolisi dell'ATP e catalisi del ripiegamento: In vitro, stimola l'idrolisi dell'ATP e il ripiegamento di proteine non ripiegate mediato da HSPA1A/B (HSP70-1), dimostrando un'attività chaperone diretta (PubMed:24318877).
  Riferimenti correlati:
  PMID:24318877
• Localizzazione subcellulare: La proteina si trova nel citoplasma, nel nucleo e nel nucleolo, e shuttla tra questi compartimenti in condizioni normali e di stress.
• Modifiche post-traduzionali: È una fosfoproteina e la sua attività può essere regolata tramite fosforilazione; dati proteomici aggiuntivi confermano la sua identità.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Progettazione dell'immunogeno: L'anticorpo è stato prodotto contro un peptide sintetico compreso tra gli amminoacidi 241–340 del DNAJB1 umano, una regione probabilmente esposta nella proteina nativa e conservata tra uomo, topo e ratto, in linea con la reattività crociata osservata.
• Western blotting (WB): Per il WB, utilizzare lisati cellulari sottoposti a shock termico o indotti da stress come controlli positivi; aspettarsi bande vicino a 27 kDa e 38 kDa (corrispondenti a diverse isoforme o modifiche). Ottimizzare il caricamento e gli anticorpi di rilevazione in base al tuo campione.
• Citometria a flusso (intracellulare): Per la FC intracellulare, sono necessarie permeabilizzazione e fissazione per rilevare l'HSP40 citoplasmatico e nucleare; convalidare la colorazione con cellule sottoposte a shock termico rispetto a cellule non trattate.
• Applicazioni ELISA: Questo anticorpo monoclonale può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione in ELISA sandwich; deve essere testato l'opportuno accoppiamento con un anticorpo di rilevazione (ad esempio, un anti-HSP40 policlonale).

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