Anticorpo policlonale di coniglio anti-HSP47/SERPINH1 per WB, IF/ICC, ELISA - P50454

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di HSP47/SERPINH1

• HSP47, noto anche come Serpin H1, è una proteina da shock termico di 47 kDa (colligina) appartenente alla superfamiglia delle serpina ed è codificata dal gene SERPINH1 nell'uomo.
• Svolge la funzione di chaperone molecolare specifico per il collagene nel reticolo endoplasmatico, essenziale per la corretta biosintesi, ripiegamento e trimerizzazione del collagene.
• La proteina risiede nel lume del reticolo endoplasmatico, dove si associa transitoriamente agli intermedi del procollagene per prevenire l'aggregazione prematura.
• Nomi alternativi sono CBP1, CBP2, gp46, AsTP3, PIG14, RA-A47 e SERPINH2, che riflettono la sua scoperta in diversi contesti cellulari e patologici.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e N-glicosilazione, che possono regolarne l'attività e la stabilità.
• L'espressione di HSP47 è upregolata in condizioni di stress (ad esempio shock termico) ed è fondamentale per l'omeostasi del collagene nei tessuti connettivi; le mutazioni in SERPINH1 sono associate all'osteogenesi imperfetta.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 139–418 di HSP47/SERPINH1 umano (NP_001226.2), espresso come proteina di fusione ricombinante. Questa regione copre una porzione consistente del dominio serpin, presentando probabilmente più epitopi per la generazione di anticorpi policlonali.
• Nel Western blot (WB) è prevista una banda intorno ai 46 kDa in condizioni riducenti e denaturanti. Convalidare la rilevazione in linee cellulari o tessuti pertinenti che esprimono collagene (ad esempio fibroblasti, osteoblasti). Utilizzare appropriati controlli di caricamento.
• Per immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC) è richiesta la permeabilizzazione (ad esempio con Triton X-100 o saponina) per accedere al lume del reticolo endoplasmatico. È previsto un pattern di colorazione reticolare tipico delle proteine ER. Confermare tramite co-colorazione con un marcatore del reticolo endoplasmatico.
• Nel test ELISA, specificità e titolo dell'anticorpo devono essere ottimizzati utilizzando HSP47 ricombinante o lisati cellulari. Essendo un reagente policlonale, la coerenza lotto per lotto deve essere verificata per saggi quantitativi.
• La reattività crociata con l'HSP47 di topo è confermata; per altre specie, è necessario controllare l'omologia di sequenza prima dell'uso.

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