Anticorpo policlonale di coniglio anti-HSP60/HSPD1 per WB - P10809

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di HSP60/HSPD1

• HSP60, nota anche come HSPD1, CPN60 o proteina da shock termico da 60 kDa, è una chaperonina mitocondriale essenziale per l'importazione, il ripiegamento e l'assemblaggio delle proteine all'interno dell'organello.
• Insieme alla sua co-chaperonina Hsp10, HSP60 forma una struttura a doppio anello che lega le proteine substrato non ripiegate, utilizza l'idrolisi dell'ATP per racchiuderle in una cavità di ripiegamento e le rilascia in seguito allo scambio nucleotidico. Riferimenti correlati: PMID:11422376 PMID:1346131
• In condizioni di stress, HSP60 previene il ripiegamento errato e promuove il ripiegamento delle catene polipeptidiche denaturate o parzialmente non ripiegate, mantenendo così la proteostasi mitocondriale.
• La proteina è localizzata esclusivamente nella matrice mitocondriale, come indicato dal suo peptide di transito N-terminale che ne dirige l'importazione nell'organello.
• Numerose modificazioni post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione e coniugazione simile all'ubiquitina, regolano la stabilità, l'attività e le interazioni di HSP60.
• Le mutazioni in HSPD1 sono associate a disturbi neurologici quali la paraplegia spastica ereditaria (SPG13) e la leucodistrofia ipomielinizzante, sottolineandone il ruolo cruciale nella funzione mitocondriale neuronale.
• Lo splicing alternativo genera isoforme distinte che possono mostrare un'espressione specifica per tessuto o dipendente dalle condizioni, sebbene il loro significato funzionale sia ancora oggetto di studio.
• HSP60 è inoltre implicata nelle interazioni ospite-virus e può essere rilasciata nello spazio extracellulare in determinate condizioni patologiche, nelle quali può modulare le risposte immunitarie.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per l'analisi mediante Western blot, si prevede una banda predominante intorno a 61 kDa; si consiglia di arricchire le frazioni mitocondriali per aumentare la specificità del segnale.
• Nell'immunofluorescenza o nell'immunoistochimica, si consiglia la co-colorazione con un marcatore mitocondriale (ad es. TOM20, COX IV) per confermare la localizzazione subcellulare.
• L'immunoprecipitazione eseguita con questo anticorpo può co-arricchire i complessi HSP60 con Hsp10; convalidare le interazioni in condizioni native.
• Il rilevamento basato su ELISA può essere ottimizzato utilizzando la proteina HSP60 ricombinante come standard per calibrare la sensibilità e l'intervallo dinamico.
• La reattività crociata con gli omologhi di topo e ratto offre flessibilità nei sistemi modello di mammifero; tuttavia, eseguire una validazione iniziale nella specie scelta.

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