Anticorpo policlonale coniglio anti-HSP70/HSPA1A per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P0DMV8/P0DMV9

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di HSP70/HSPA1A

• HSPA1A (Heat Shock 70 kDa Protein 1A) è un membro canonico della famiglia di chaperone molecolari HSP70, essenziale per l'omeostasi proteica sia in condizioni normali che di stress (UniProt).
• Agisce come chaperone dipendente da ATP: cicla tra gli stati legato ad ATP (bassa affinità per il substrato) e legato ad ADP (alta affinità per il substrato), facilitando il legame e il rilascio del substrato, con co-chaperone a dominio J (HSP40s) che stimolano l'attività ATPasica e fattori di scambio di nucleotidi (famiglia BAG) che promuovono il rilascio di ADP. Riferimenti correlati: PMID:24012426 PMID:24318877 PMID:26865365
• Governa la triage proteica: il suo stato di acetilazione determina se promuove il ripiegamento tramite HOPX o la degradazione mediata dall'ubiquitina tramite STUB1/CHIP, bilanciando così il controllo della qualità del proteoma. Riferimenti correlati: PMID:27708256
• Si localizza principalmente nel citoplasma e nel nucleo, ma si associa anche al centrosoma durante la mitosi, dove è richiesto per l'integrità del polo del fuso e l'assemblaggio del fuso bipolare. Riferimenti correlati: PMID:27137183
• Regola le vie di segnalazione chiave: potenzia l'ubiquitinazione e la degradazione mediata da STUB1 di SMAD3 (inibendo la segnalazione TGF‑β) e FOXP3 (nelle cellule T regolatorie durante l'infiammazione). Riferimenti correlati: PMID:24613385 PMID:23973223
• Partecipa alla clearance dei fattori di trascrizione mal ripiegati, come PRDM1/Blimp‑1, trattendoli nel citoplasma e indirizzandoli per la degradazione proteasomica. Riferimenti correlati: PMID:28842558
• Regola negativamente l'attività trascrizionale di HSF1 durante la fase di recupero della risposta allo shock termico, contribuendo all'attenuazione della risposta allo stress. Riferimenti correlati: PMID:9499401
• Può essere secreto extracellularmente e, in certi contesti patologici, funge da recettore della cellula ospite per l'ingresso del rotavirus A. (SWISS-PROT)

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una sequenza all'interno degli amminoacidi 500-600 di HSPA1A umana, una regione altamente conservata tra umano, mouse e ratto; pertanto, ci si aspetta un'ampia cross‑reattività, ma gli utenti dovrebbero validare le prestazioni nel loro specifico sistema di campioni.
• Per il Western blot, si osserva una banda a ~70 kDa; includere sempre appropriati controlli positivi (es. lisato di HeLa trattato con shock termico) e negativi, e considerare l'uso di una proteina housekeeping per la normalizzazione.
• Per l'immunofluorescenza e l'immunoistochimica, ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione, poiché HSP70 può essere presente sia nei compartimenti citoplasmatici che nucleari; il recupero dell'antigene potrebbe essere necessario per sezioni paraffinate incluse in formalina.
• Quando si utilizza in ELISA, assicurarsi che il tampone di rivestimento e le condizioni di blocco siano compatibili con gli anticorpi policlonali per minimizzare il legame non specifico.
• Questo anticorpo è stato riportato per l'uso in Western blot, immunofluorescenza/immunocitochimica, immunoistochimica (paraffina) ed ELISA; per altre applicazioni, potrebbe essere necessaria un'ulteriore ottimizzazione.

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