Anticorpo policlonale di coniglio anti-HTRA2 per WB, IHC-P, IP, ELISA - O43464

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di HTRA2

• HTRA2 (proteina A2 ad alta richiesta di temperatura), nota anche come endoproteasi regolata dallo stress Omi o serina proteasi 25, è una serina proteasi mitocondriale codificata dal gene HTRA2.
• Promuove l'apoptosi attraverso molteplici meccanismi: alleviando l'inibizione delle proteine BIRC (come BIRC6) sulle caspasi (CASP3, CASP7, CASP9), determinando un aumento dell'attività delle caspasi; oppure attraverso una via indipendente dalle caspasi e dipendente dalla serina proteasi. Inoltre, HTRA2 scinde THAP5 favorendone la degradazione durante l'apoptosi. (PubMed:10873535, 15200957, 36758104, 36758105, 19502560) Riferimenti correlati: PMID:10873535, PMID:15200957, PMID:36758104, PMID:36758105, PMID:19502560
• Lo splicing alternativo può generare un'isoforma proteoliticamente inattiva di HTRA2.
• A livello subcellulare, HTRA2 si localizza principalmente nello spazio intermembrana e nella membrana dei mitocondri, ma è presente anche nel reticolo endoplasmatico.
• È espresso ubiquitariamente nei tessuti.
• HTRA2 è associato a disturbi neurodegenerativi, in particolare alla malattia di Parkinson, ed è indicato tra le parole chiave come apoptosi, serina proteasi e splicing alternativo.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (amminoacidi 334–458) di HTRA2 umano, caratteristica che può contribuire a una buona accessibilità e specificità dell'epitopo.
• Per il Western blot (WB), nei lisati di campioni umani, di topo e di ratto è prevista una banda di circa 49 kDa. Si consiglia di utilizzare inibitori delle proteasi durante la preparazione dei campioni per evitare la degradazione.
• Per l'immunoistochimica su sezioni incluse in paraffina (IHC-P), si raccomanda di ottimizzare il recupero antigenico (ad es., recupero dell'epitopo indotto dal calore a pH 6 o 9) e la concentrazione dell'anticorpo. Utilizzare controlli appropriati.
• Per l'immunoprecipitazione (IP), la natura policlonale dell'anticorpo può consentire una cattura efficiente della proteina a lunghezza intera; validare empiricamente le condizioni di cattura e rilevazione.
• Per l'ELISA, si consiglia di abbinarlo a uno specifico anticorpo di rilevazione e di verificare la reattività crociata con proteine sieriche correlate se si utilizzano campioni complessi.
• La reattività crociata con gli ortologhi di topo e ratto rende questo anticorpo adatto agli studi su modelli di roditori; tuttavia, è necessario confermare la reattività crociata nella propria applicazione specifica.

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