Anticorpo monoclonale anti-CD100/SEMA4D umano () per IF/ICC e FC - Q92854

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Semaphorin-4D

• La Semaphorin-4D (SEMA4D), nota anche come CD100, A8, BB18 o GR3, è un membro della famiglia delle semaforine codificata dal gene SEMA4D. Lo splicing alternativo produce isoforme; l'isoforma canonica ha un peso molecolare di ~96 kDa.
• Funziona come recettore per le plessine PLXNB1 e PLXNB2, svolgendo un ruolo critico nella segnalazione cellula-cellula. Riferimenti correlati: PMID:20877282
• Nel sistema nervoso, la SEMA4D regola lo sviluppo delle sinapsi GABAergiche e modula la complessità e l'arborizzazione dei neuriti in sviluppo nei neuroni dell'ippocampo tramite l'attivazione di RHOA mediata da PLXNB1. Riferimenti correlati: PMID:19788569
• Promuove la migrazione delle cellule granulari del cervelletto e induce la migrazione delle cellule endoteliali attraverso l'attivazione di PTK2B/PYK2, SRC e della via fosfatidilinositolo 3-chinasi-AKT. Riferimenti correlati: PMID:16055703
• Nel sistema immunitario, la SEMA4D induce l'aggregazione delle cellule B e ne migliora la vitalità in vitro. Riferimenti correlati: PMID:8876214
• Si localizza alla membrana cellulare e viene anche secreta nello spazio extracellulare.
• È fortemente espressa nel muscolo scheletrico, nei linfociti del sangue periferico, nella milza e nel timo; espressione inferiore nei testicoli, cervello, rene, intestino tenue, prostata, cuore, placenta, polmone e pancreas. Non rilevata nel colon e nel fegato.
• Contiene un dominio immunoglobulinico, è glicosilata, fosforilata e possiede un legame disolfuro. Coinvolta nella neurogenesi, differenziazione e processi di sviluppo.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre l'intera regione extracellulare (aa 22-734) della SEMA4D umana, suggerendo che l'anticorpo probabilmente riconosce un epitopio nel dominio extracellulare. Per l'immunofluorescenza, considerare l'uso di una permeabilizzazione appropriata per rilevare la proteina legata alla membrana; una permeabilizzazione lieve può anche rivelare pool intracellulari se presenti.
• Per la citometria a flusso con il coniugato , titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale per il tipo di cellule. è luminoso e fotostabile, adatto a pannelli multiplex.
• Dato che la SEMA4D è espressa sulle cellule immunitarie e in certi tessuti, validare l'anticorpo nel sistema di campione pertinente, in particolare per i modelli di espressione tessuto-specifica.
• Nota che la SEMA4D può essere secreta; differenziare la colorazione di superficie e intracellulare ottimizzando i protocolli di fissazione/permeabilizzazione quando necessario.

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