Anticorpo monoclonale anti-CD140b/PDGFRβ umano per citometria a flusso - P09619

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del PDGFRβ

• Il PDGFRβ è un recettore tirosin-chinasico che lega omodimeri di PDGFB e PDGFD, nonché eterodimeri PDGFA-PDGFB, regolando la proliferazione, sopravvivenza, migrazione e differenziazione cellulare.
• Riveste un ruolo essenziale nello sviluppo embrionale, in particolare nella formazione del sistema cardiovascolare, nell'angiogenesi e nel reclutamento di periciti verso le cellule endoteliali.
• La segnalazione del PDGFRβ è cruciale per la migrazione delle cellule muscolari lisce vascolari e per la formazione della neointima nei siti di danno vascolare.
• Il recettore è inoltre necessario per il normale sviluppo del glomerulo renale, mediando il reclutamento delle cellule mesangiali e la ramificazione della rete capillare.
• Il legame del ligando attiva molteplici vie intracellulari, tra cui PI3K-AKT, RAS-MAPK e PLCγ, portando a riarrangiamenti del citoscheletro e ondulazioni della membrana.
• Il PDGFRβ si localizza principalmente sulla membrana cellulare, ma risiede anche in vescicole citoplasmatiche e nel lume dei lisosomi dopo l'internalizzazione.
• Le modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione, fosforilazione, formazione di legami disolfuro e coniugazione con ubiquitina, che regolano l'attività e il turnover del recettore.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Questo anticorpo è stato generato contro il dominio extracellulare (aa 33–530) del PDGFRβ umano; si prevede che riconosca la conformazione nativa su cellule vive, ma si consigliano titolazione e validazione nel sistema cellulare rilevante.
• Per la citometria a flusso, utilizzare un appropriato controllo isotipo monoclonale di coniglio coniugato con lo stesso fluoroforo e includere il blocco del recettore Fc quando si lavora con cellule che esprimono alti livelli di FcR.
• Il PDGFRβ è espresso su cellule muscolari lisce vascolari, periciti, fibroblasti e alcune linee cellulari tumorali; verificare l'espressione nel proprio modello prima della colorazione.
• Quando si esegue una co-colorazione con altri anticorpi, assicurare la compatibilità dei fluorofori ed eseguire appropriati controlli di compensazione.
• La fissazione con paraformaldeide può influenzare l'accessibilità dell'epitopo; se è necessaria la fissazione, testare sia le condizioni su cellule vive che fissate per ottimizzare la colorazione.

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