Anticorpo monoclonale anti-CD15/SSEA-1 umano per citologia a flusso - P22083

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CD15/SSEA-1 (FUT4)

• La proteina codificata da FUT4 (ID gene 2526) è l'alfa-(1,3)-fucosiltransferasi 4, una glicosiltransferasi responsabile della fase finale di fucosilazione che crea l'antigene carboidrato Lewis X (CD15/SSEA-1) sulle glicoproteine N‑ e O‑legate. Riferimenti correlati: PMID:1702034 PMID:1716630 PMID:29593094

• FUT4 trasferisce il fucosio dal GDP‑β‑L‑fucosio alla N‑acetilglucosamina distale delle catene di lattosammina di tipo‑2 (Galβ1‑4GlcNAc), in modo più efficiente su accettori non sialilati, generando così l'epitopo Lewis X. Riferimenti correlati: PMID:1716630 PMID:29593094

• In determinati tipi cellulari, FUT4 può anche fucosilare un residuo GlcNAc interno per produrre l'antigene VIM‑2, un ligando per la E‑selettina (SELE). Riferimenti correlati: PMID:11278338 PMID:1716630

• Insieme a FUT7, FUT4 contribuisce alla biosintesi dei ligandi delle selettine (sialil Lewis X e 6‑sulfo sialil Lewis X) che mediano il rotolamento dei leucociti e l'homing verso i siti di infiammazione.

• FUT4 è una proteina transmembrana che risiede nella membrana della pila dell'apparato di Golgi, dove incontra i suoi substrati glicoproteici durante il transito attraverso la via secretoria.

• L'espressione è stata rilevata nelle cellule staminali mesenchimali derivate dal midollo osseo, nei promielociti immaturi del sangue del cordone ombelicale e nelle popolazioni mieloidi e linfoidi del sangue periferico.

• La proteina contiene siti di inizio alternativi ed è essa stessa N‑glicosilata; appartiene alla famiglia delle glicosiltransferasi 10 e contiene una sequenza segnale-ancora.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico derivato da CD15/SSEA-1 umano; considerare che l'anticorpo può riconoscere un epitopo lineare che imita la struttura carboidrata nativa o uno scheletro peptidico della glicoproteina vettore.
• Per la citometria a flusso, includere i controlli di isotipo appropriati e verificare la reattività su una linea cellulare CD15‑positiva (es., HL‑60) e su una linea CD15‑negativa (es., K562).
• Per le applicazioni di immunofenotipizzazione, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per la specifica popolazione cellulare e il protocollo di colorazione.
• Il peso molecolare previsto dell'enzima bersaglio è di ~59 kDa; nel western blotting (se tentato) tenere presente che l'anticorpo può rilevare sia la proteina FUT4 glicosilata sia i suoi prodotti glicoproteici che recano CD15.

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