Anticorpo monoclonale Anti-CD39/ENTPD1 umano per citometria a flusso - P49961

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di CD39/ENTPD1

• CD39/ENTPD1 è un'ectonucleoside triphosphato diphosphohydrolasi legata alla membrana che catalizza l'idrolisi sequenziale di nucleosidi triphosphati (NTP) e nucleosidi difosfati (NDP) in nucleosidi monofosfati (NMP), regolando così i livelli di nucleotidi extracellulari.
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• Convertendo l'ATP proinfiammatorio e l'ADP che attiva le piastrine in AMP, CD39 inibisce l'aggregazione piastrinica e aiuta a mantenere il flusso sanguigno.
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• L'enzima si localizza sulla membrana plasmatica e nelle caveole, posizione che gli permette di agire sui nucleotidi extracellulari.

• CD39 è espresso principalmente sulle cellule linfoidi attivate, e si trova anche nei tessuti endoteliali, con elevata espressione nella placenta, nel polmone, nel muscolo scheletrico e nel rene.
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• Le modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione e palmitoilazione; la proteina contiene legami disolfuro e lo splicing alternativo genera molteplici isoforme.

• Le mutazioni nel gene ENTPD1 sono associate alla paraplegia spastica ereditaria autosomica recessiva 64 (SPG64), il che sottolinea la sua importanza per la funzione neuronale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 255-442) copre una parte del dominio extracellulare di CD39, che è accessibile per il legame dell'anticorpo nella citometria a flusso su cellule vive; assicurarsi che l'epitopo sia preservato in condizioni di colorazione native.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per identificare la concentrazione di colorazione ottimale per la vostra popolazione cellulare, poiché i livelli di espressione di CD39 variano tra cellule a riposo e cellule attivate.
• Includere controlli di isotipo appropriati e un colorante di vitalità per escludere le cellule morte che possono mostrare legame non specifico.
• Quando si progettano pannelli di citometria a flusso multicolore, verificare che non si sovrapponga ad altri fluorofori utilizzati; considerare l'uso di controlli a colorazione singola per la compensazione.
• Validare la colorazione di CD39 su cellule positive note, come linfociti attivati o linee cellulari endoteliali, e confermare la specificità per correlazione con metodi di rilevazione indipendenti di CD39.

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